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预制胶在wb实验中的应用

时间：2019-08-19 点击次数：9262

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蛋白免疫印迹实验(Western Blot,WB )是很常用的生物实验，是用抗体检测蛋白的重要方法之一。其原理是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。Western Blot与Southern或Northern杂交方法原理类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺（PAM ）凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。
 
Wb实验是一个步骤繁多的实验，每一步都会对最后的结果产生影响，其中电泳过程是较为关键重要的一步。好的电泳能让目的条带整齐，结果图让人眼前一亮。电泳的支持介质为聚丙烯酰胺凝胶，该凝胶的聚合由丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺单体在自由基的催化下完成。
 
在实验室使用过程中其实在自行配制WB所需凝胶时需准备很多试剂和材料，包括：ddH2O，30%丙烯酰胺混合液(29：1，丙烯酰胺：甲叉丙烯酰胺)，1.5M Tris（pH 8.8），1.0M Tris（pH 6.8）,10% SDS，10%过硫酸铵(APS)，N,N,N',N'四甲基二乙胺(TEMED)等。其中丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺单体具有神经毒性，作用具有累积性； APS也有一定毒性，对皮肤粘膜有刺激性和腐蚀性；吸入后引起鼻炎、喉炎、气短和咳嗽等。眼、皮肤接触可引起强烈刺激、疼痛甚至灼伤。口服引起腹痛、恶心和呕吐，长期皮肤接触可引起变应性皮炎。TEMED对粘膜和上呼吸道组织及皮肤有很大的破坏作用，具有强神经毒性。
 
电泳是 WB 实验中的重头戏，稍有不慎就只能对着 「微笑线」和 「皱眉线」 叹气。电泳胶是影响电泳效果的重要因素之一，配制之后胶经常也会影响科研学者们的实验结果。如果您不想在自行配置中接触丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺这些有毒试剂？如果您经常也对自行配制之后的胶充满无奈，建议您可以试试爱必信品牌的预制胶。
 
爱必信预制胶与传统的实验室自行配制凝胶相比，具有以下优点：
1. 即开即用，不用再自行配制配胶所需溶液、灌胶、等胶凝固，节省您的宝贵的时间和精力；
2. 不用再接触丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺，过硫酸铵（APS）以及TEMED等几种具有积累性神经毒性的试剂；
3. 大规模生产，胶与胶之间重复性好，质量稳定，不像手工灌胶那样结果差异大。
 
产品特点：
1. 高性能：分离能力强，分辨率高；
2. 超长保质期：2-8℃可以稳定保存一年；
3. 快速：仅需40~50min即可完成电泳；
4. 重复性高：不同批次预制胶的一致性好；
5. 物美价廉：相对目前市场其他品牌价格低，节约实验成本；
 
我们提供的预制胶系统有8%，10%，12%，15%，4%-15%，4-20%，8-20%多种规格，可供您的选择更多，为您的实验贴心服务。
 
实验步骤   推荐指数   货号   产品名称   规格
上样与电泳 　   abs9226   DTT溶液(1mol/L)   5ml,10ml
　   abs9237   2X Laemmli样品缓冲液   5ml*2
　   abs9238   10%SDS十二烷基硫酸钠溶液   500ml
  ★★   abs953   2*上样缓冲液 (适用于SDS-PAGE)   10ml
  ★★   abs9301   预制胶 10%,10 wells   5片/盒
  ★★   abs9308   预制胶 10%,15 wells   5片/盒
  ★★   abs9302   预制胶 12%,10 wells   5片/盒
  ★★   abs9309   预制胶 12%,15 wells   5片/盒
　   abs9303   预制胶 15% ,10 wells   5片/盒
　   abs9310   预制胶 15% ,15 wells   5片/盒
　   abs9304   预制胶 4-15%, 10 wells   5片/盒
　   abs9311   预制胶 4-15%, 15 wells   5片/盒
  ★★   abs9305   预制胶 4-20%, 10 wells   5片/盒
  ★★   abs9312   预制胶 4-20%, 15 wells   5片/盒
　   abs9307   预制胶 8%, 15 wells   5片/盒
　   abs9306   预制胶 8-20%, 10 wells   5片/盒
　   abs9313   预制胶 8-20%, 15 wells   5片/盒
  NEW   abs9328   3-5kd小分子量预制胶，16.5%，10wells   10片/盒
  NEW   abs9329   3-5kd小分子量预制胶，16.5%，15wells   10片/盒
  ★★★   abs925   蛋白电泳套装   盒
　   abs951   running buffer   100ml,1L
  ★★★★★   abs923   预染蛋白marker, 10-245 KDa   500ul,5*500ul
  ★★★★★   abs924   预染蛋白marker, 10-180 kDa   250ul,2*250ul
　   abs966   Genshare考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液   500ml
  ★★★   abs964   考马斯亮蓝染色试剂盒(常规型)R250   1kit
　   abs965   考马斯亮蓝染色试剂盒(增强型)G250   1kit
样本制备 　   abs9228   RIPA (中)   100ml
　   abs9229   RIPA (强)   100ml
　   abs9230   RIPA (弱)   100ml
　   abs9231   RIPA (强，无抑制剂)   100ml
　   abs9160   NP-40   100ml
　   abs9195   1M Tris-HCl，pH6.8   1L
　   abs9201   1M Tris-HCl，pH8.8（更多pH请看官网）   1L
　   abs9117   SDS   100ml
  ★★   abs9116   WB/IP 细胞裂解液   100ml
  ★★   abs9239   WB/IP 细胞裂解液(无抑制剂)   100ml
  ★★★★   abs9101   红细胞裂解液   100ml,250ml,500ml
　   abs812852   PMSF   50mg,100mg,200mg
　   abs816442   Aprotinin 抑肽酶  10mg,25mg,50mg,100mg
　   abs817902   Peptatin 胃蛋白酶抑制剂A  10mg,25mg,50mg,100mg
　   abs9133   EDTA   100ml
　   abs42017684   EGTA   1g,10g
　   abs817431   原钒酸盐   100mg,500mg
　   abs47014865   β-甘油磷酸盐   10g,25g
  ★★   abs9161   广谱型蛋白酶抑制剂混合物   1ml
  ★★   abs9162   广谱型磷酸酶抑制剂混合物   1ml
蛋白定量   ★★   abs9232   BCA蛋白定量试剂盒   500次,2500次
  ★★   abs9233   增强型BCA 蛋白定量试剂盒   500次
转膜 　   abs931   PVDF膜0.2 μm   20张
  ★★   abs932   PVDF膜0.45 μm   20张
  ★★   abs959   NC膜0.2 μm   20张
　   abs960   NC膜0.45 μm   20张
　   abs950   10*电转液   100ml,1L
封闭 　   abs9174   脱脂奶粉   100g,500g
  ★★★★★   abs9155   BSA   50g,100g
一抗孵育   ★★   abs830031   Beta actin antibody    50ul,100ul
　   abs132001   Beta actin antibody    50ug,100ug
　   abs119600   Beta Actin Polyclonal Antibody   50ul,100ul
　   abs132184   Beta-Actin antibody   50ug,100ug
　   abs137975   Beta-Actin Mouse Monoclonal Antibody   50ug,100ug
  ★★   abs830030   GAPDH antibody   50ul,100ul
　   abs132004   GAPDH antibody   50ug,100ug
　   abs137959   GAPDH Mouse Monoclonal Antibody   50ug,100ug
　   abs118936   GAPDH Polyclonal Antibody   50ul,100ul
　   abs131993   Tubulin alpha Antibody   50ug,100ug
  ★★   abs830032   Tubulin Beta antibody   50ul,100ul
　   abs131994   Tubulin beta Antibody   50ug,100ug
　   abs125209   Tubulin Beta Polyclonal Antibody   50ul,100ul
二抗孵育   ★★   abs20001   Goat anti-mouse IgG-HRP   100ul,500ul,1ml
  ★★   abs20002   Goat anti-rabbit IgG-HRP   100ul,500ul,1ml
  ★★   abs20003   Goat anti-Mouse IgG-FITC   1ml,500ul,100ul
  ★★   abs20004   Goat anti-Rabbit IgG-FITC   100ul,500ul,1ml
  ★★   abs20005   Rabbit anti-Goat IgG-HRP   100ul,500ul,1ml
一抗孵育 　   abs830001   Anti- GST   50ul,100ul
　   abs830002   Anti- His Tag抗体   50ul,100ul
　   abs830003   Anti- His(C-terminal Specific) 抗体   50ul,100ul
　   abs830004   Anti- Myc 抗体   50ul,100ul
　   abs830005   Anti- DYKDDDDK   50ul,100ul
　   abs830006   Anti- HA 抗体   50ul,100ul
　   abs830008   Anti-V5,mAb   50ul,100ul
　   abs830010   Anti- GST,HRP   50ul
　   abs830011   Anti- His Tag (HRP) 抗体   50ul
　   abs830012   Anti- His(C-terminal Specific) (HRP) 抗体   50ul
　   abs830013   Anti- Myc (HRP) 抗体   50ul
　   abs830014   Anti- DYKDDDDK,HRP   50ul
　   abs830015   Anti- HA (HRP) 抗体   50ul
　   abs830016   Anti- V5 (HRP) 抗体   50ul
　   abs137956   C-Myc-Tag Mouse Monoclonal Antibody   50ug,100ug
　   abs137958   Flag-Tag Mouse Monoclonal Antibody   50ug,100ug
显色   ★★★★★   abs920    ECL化学发光检测试剂盒   2*25ml,2*50ml,2*250ml
　   abs9212   DAB 显色试剂盒（棕黄色，WB）   1kit
　   abs9213   DAB 显色试剂盒（紫蓝色，WB）   1kit
其他辅助试剂 　   abs952   10*TBST   100ml,1L
　   abs9152   Tween-20   500ml
  ★★   abs954   WB专用一抗二抗稀释液   100ml
　   abs969   Western一抗二抗去除液（中性）   250ml
　   abs968   Western一抗二抗去除液（弱碱性）   250ml
　   abs967   Western一抗二抗去除液（强碱性）   250ml
新手必备   ★★★★★   abs926   WB solution base kit（rabbit）   1kit
  ★★★★★   abs927   WB solution base kit（mouse）   1kit
  ★★★★★   abs928   WB solution base kit（goat）   1kit

 

Absin特色产品线：
WB相关：ECL发光液、预染marker、预制胶；IHC相关：二抗试剂盒、组化笔；IP/CoIP试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；ELISA试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

 

爱必信(上海)生物科技有限公司

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