免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液
- Lysis Buffer for WB/IP Assays;Western及IP细胞裂解液(带抑制剂)
货号-规格 | 货期 | 价格 | 数量 |
abs9116-100ml | 1-2周 | ¥378.00 | - + |

产品描述 | |||||||||||||
描述 | 本免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液(Lysis Buffer for WB/IP Assays)是在非变性环境内裂解细胞的一款裂解液,主要成分为 20mM Tris-HCl(pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及焦磷酸钠,β-甘油磷酸,正钒酸钠,EDTA 和抑肽酶等多种抑制剂,可广谱且有效抑制蛋白降解,并且维持原先蛋白间相互作用。经本品裂解所得的蛋白样品,适用于 PAGE,蛋白免疫印迹(Western Blot),免疫沉淀(IP),免疫共沉淀,ELISA 等实验。经本品裂解收集的蛋白样品,可使用增强型 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定总蛋白浓度。由于本品含有较高浓度的 Triton X-100 等干扰物质,不适合用 Bradford法来测定总蛋白浓度。 产品组分
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外观 | 溶液 | ||||||||||||
使用方法 | 1、试剂准备: 取适当量的裂解液,在使用前数分钟内将磷酸酶抑制剂按照1:50 加入裂解液中,加入100mM 的PMSF并使PMSF 的最终浓度为1mM。 2、细胞/组织的裂解: 对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗—遍。按照 6 孔板每孔加入 150-250µL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞 1-2 秒后,细胞就会被裂解。如果用于 ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分; 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞加入150-250µL 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 对于组织样品:用组织剪将组织剪成碎片后,按照每 20mg 组织加入 150-250µL 裂解液的比例加入裂解液,并使用用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。如果用于 ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 3、蛋白样品收集: 充分裂解后,10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、Western 和 lP 等操作。 | ||||||||||||
注意事项 | 1、为取得最佳的使用效果,可以适当分装后-20°C 保存使用,避免过多的反复冻融。 2、裂解样品的所有步骤都需在冰上或 2~8°C 进行。 3、为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。 | ||||||||||||
基本信息 | |||||||||||||
别名 | Western及IP细胞裂解液(带抑制剂) | ||||||||||||
储存/保存方法 | 细胞裂解液A保存于2~8℃,B、C保存于-20℃。有效期12个月。 | ||||||||||||
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究 |
- 实验方法 实验条件
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- 细胞进行裂解后,还有剩余没有裂解,可以加大裂解液的量吗?会对后续实验有影响吗?
- 用枪多吹打几次,少许残留细胞不会影响。不太建议增大体积,可能会导致蛋白浓度过低。客户也可以bca测一下蛋白浓度,如果浓度可以的话,可以再适当增加一点用量
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