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  • Western一抗二抗去除液(强碱性)

    货号: abs967
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    abs967-500ml 现货 ¥320.00
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    产品描述
    描述

        Western一抗二抗去除液又称膜再生液或Western抗体洗脱液(Stripping buffer),用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测GAPDH、β-actin等表达量相对稳定的管家蛋白或其它蛋白作为参照。Stripping buffer可以洗脱一抗二抗,非常方便地重新利用使用过的膜,检测其它蛋白。 Stripping buffer多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱不宜重复利用膜,一般可以利用2~3次。

        通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个 SDS-PAGE 胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。

        Western一抗二抗去除液(强碱性)主要依靠碱性来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失, 适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复利用,尤其适用于PVDF膜,其次为硝酸纤维素膜。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB,NBT/BCIP)不适用于本试剂。

    使用方法
    1、在膜完成Western化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5min。
    2、弃蒸馏水,加入Western一抗二抗去除液(强碱性),完全覆盖住膜。
    3、摇床上漂洗15-20min。
    4、弃液,尽量把Western一抗二抗去除液(强碱性)去除干净,必要情况下,可以用滤纸吸干。
    5、加入蒸馏水振荡漂洗2~3次,每次漂洗3~5min。
    6、入封闭液进行封闭后(推荐酪氨酸或脱脂奶粉作为封闭液),进行Western后续操作。
    注意事项
    1、使用辣根过氧化物酶标记的抗体时,封闭液必须使用5%脱脂奶粉配制。使用碱性磷酸酯酶标记的抗体时,封闭液必须使用酪蛋白(casein)配制。
    2、Western一抗二抗去除液(强碱性)特别适用于PVDF膜的再生,硝酸纤维素膜的再生效果不如PVDF膜。
    3、Western一抗二抗去除液(强碱性)适用于ECL等类似的化学发光液的检测后的一抗二抗洗脱。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB,NBT/BCIP)不适用于本试剂。
    4、Western一抗二抗去除液(强碱性)有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。
    5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
    基本信息
    PH值
    pH=11.8
    储存/保存方法
    4℃保存,有效期12个月。
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
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