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六色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)
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  • 六色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)

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      • 微波修复抗原每一轮染色都要做吗?可以用抗体洗脱液替代吗?抗体洗脱液用在哪个步骤?
      • 染第一个抗体之前做抗原修复,是为了使被石蜡或者固定剂封闭的抗原决定簇重新暴露出来,使得抗体能够识别到抗原;在染后面每一个抗体之前的抗原修复,目的是为了去除掉上一轮染色的抗体和残留没有结合上的染料,其实更准确的叫法是“抗体洗脱”,也就是说第一次的抗原修复是真正的抗原修复,后面的抗原修复实际上是“抗体洗脱”,“抗体洗脱”可以用抗体洗脱液(abs994)替换,特别是细胞、冰冻切片或者骨样本,但第一次抗原修复不能被抗体洗脱液替代,冰冻切片可以不进行抗原修复,染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复,推荐冰冻切片快速抗原修复液(5×)(abs9207)
      • 脱蜡水合步骤中“10%中性福尔马林浸片10min,灭菌水洗片1min,重复3次”目的是什么?我们以前做石蜡切片的时候没有这一步。
      • 这是后固定的步骤,固定充分的组织可以省略此步。
      • 做好的多色片子,无法进行及时扫描,该如何保存?
      • 需要避光防震,在4℃条件下保存
      • 有详细的实验操作流程吗?
      • 有的,我们有完整的操作视频,您可以点击链接观看完整视频。
      • 样本可以做成冰冻切片吗?
      • 可以的。抗原修复步骤不推荐用加热的方法,推荐用抗体洗脱液(abs994)
      • 所有操作要避光吗?
      • 不需要,在常规环境下操作就可以,染料的荧光强度很高。
      • 抗体修复液每一轮修复都要更换吗?
      • 是的,每一轮都要根据抗体选择相应的修复液。
      • 染料的选择会影响后染色吗,有共定位的话怎么办?
      • 共定位的情况,我们可以通过单一通道观察来更好的检测各指标的分布情况,染料不会对染色有影响,串色的情况需要预实验做充足,包括抗体稀释比例,染料与放大液比例,修复条件的确定。
      • 多色用的一二抗各是什么种属?
      • 多色的优势在于一二抗种属无需特别要求,一抗根据样本种属选择既可,二抗根据一抗选择即可,多个抗体组合,种属不会有影响。
      • 抗体洗脱和微波修复哪种方式洗脱效果更好?
      • 微波修复洗脱更稳定,抗体洗脱液对大多数抗体都管用,难洗的抗体延长洗脱时间就可以啦!
      • 实验用时真的一天能做完吗?
      • 相比普通的组织荧光实验,我们一抗的孵育时间只需室温30min,二抗和信号放大步骤只需孵育10min,能大大节约时间,五色左右可在一天内做完。
      • 多色样本的寄送有条件限制吗?
      • 正常的石蜡切片和组织芯片很稳定,只要防震盒常温运输即可,冰冻切片的话,需要干冰低温运输。
      • 我的组织还有GFP蛋白,给结果的时候能排除干扰吗?
      • 可以的,结果分析的时候可以避免绿色通道,分析软件赋予的颜色是伪彩色,可以更换其他颜色。

      • 我这边提供抗体的话,抗体需要满足什么条件吗?
      • 抗体需要要满足IHC的实验应用,各品牌供应商都会提供相应的实验验证的,爱必信组化抗体经过严格实验验证,是不错的选择。

      • 如果我能提供抗体给你们做服务的话,需要的抗体量是多少?
      • 需要的抗体量要根据样本数来,但一般来讲,50-100ul的抗体足够完成预实验+正式实验了。

      • 在指标与染料的搭配以及染色顺序上,有什么规律吗?
      • 并没有一个特别的线性关系,和蛋白的种类、表达量以及修复条件都有关系,所以会多因素考虑,多尝试,预实验很重要。
      • TSA技术原理中有抗体洗脱的步骤,但是在你们的试剂盒步骤说明中却没有?
      • 试剂盒步骤中的抗原修复过程就是抗体洗脱过程。

      • B细胞、T细胞、DC细胞常用maker能推荐下吗?
      • T细胞:CD3、CD4、CD8、FoxP3(再细化还有:GranzymeB、PD-1、TIM-3、CD45)
        B细胞:CD19 ;
        DC细胞:CD8α、CD11b

      • 荧光染料激发光和发射光波长分别是多少?
      • 染料名称

        保存温度

        波长

        相似荧光染料

        激发波长

        发射波长

        DAPI

        -20℃

        360

        461

        DAPI

        TSA单色荧光染料480

        430

        480

        Opal480

        TSA单色荧光染料520

        490

        520

        FITC/AF488/Opal520

        TSA单色荧光染料540

        520

        540

        AF514/Opal540

        TSA单色荧光染料570

        550

        570

        CY3/AF555/Opal570

        TSA单色荧光染料620

        590

        620

        AF594/Opal620

        TSA单色荧光染料650

        640

        660

        AF610/Opal650

        TSA单色荧光染料700

        682

        702

        AF680/CY5.5/Opal690

        TSA单色荧光染料770

        740

        780

        Opal780

      • Unique DUOX2+ACE2+ small cholangiocytes are pathogenic targets for primary biliary cholangitis

        Li Xi, Li Yan, Xiao Jintao, Wang Huiwen, Guo Yan, Mao Xiuru, Shi Pan, Hou Yanliang, Zhang Xiaoxun, Zhao Nan, Zheng Minghua, He Yonghong, Ding Jingjing, Tan Ya, Liao Min, Li Ling, Peng Ying, Li Xuan, Pan Qiong, Xie Qiaoling, Li Qiao, Li Jianwei, Li Ying, Chen Zhe, Huang Yongxiu, Assis David N., Cai Shi-Ying, Boyer James L., Huang Xuequan, Tang Can-E, Liu Xiaowei, Peng Shifang, Chai Jin

        Nature Communications. 2023 Feb 09 .

        影响因子: 17.694

      • Unique DUOX2ACE2 small cholangiocytes are pathogenic targets for primary biliary cholangitis

        Xi Li,Yan Li,Jintao Xiao,Huiwen Wang,Yan Guo,Xiuru Mao,Pan Shi,Yanliang Hou,Xiaoxun Zhang,Nan Zhao,Minghua Zheng,Yonghong He,Jingjing Ding,Ya Tan,Min Liao,Ling Li,Ying Peng,Xuan Li,Qiong Pan,Qiaoling Xie,Qiao Li,Jianwei Li,Ying Li,Zhe Chen,Yongxiu Huang,David N. Assis,Shi-Ying Cai,James L. Boyer,Xuequan Huang,Can-E Tang,Xiaowei Liu,Shifang Peng,Jin Chai

        Nat Commun.. 2023 Feb 09 .

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