凋亡检测

细胞死亡有两种不同的方式：凋亡和坏死。在正常组织中，不需要的细胞可以发生主动而自发的死亡，这种细胞的程序性死亡也被成为细胞凋亡。与坏死不同，细胞凋亡不伴炎症反应，细胞被快速清除而不影响组织的整体功能，是真核细胞死亡最常见的形式。两者可根据死亡细胞的形态、生物化学改变等的不同而加以鉴别。细胞凋亡在调控细胞数量上发挥与增值相反的作用，和分化、增值协调作用，保持机体正常生存和动态平衡不可或缺的两个方面。正常的细胞凋亡在许多生理过程中包括免疫系统成熟和效应机制、组织、器官和四肢胚胎发育、神经系统的发育以及激素依赖的组织重塑等都是必需的。

许多因素都可诱发细胞发生凋亡，如：某些细胞被剥夺其生存依赖的细胞因子（如IL-3、促红细胞生成素等）或TNF、Fas等死亡受体被激活后都可诱发凋亡；正常细胞在遭遇非生理性刺激（如抗肿瘤药物、离子辐射等）时也可发生凋亡。凋亡紊乱（生理性的细胞凋亡受到抑制或和病理性的细胞凋亡过度）在许多疾病诸如缺血、中风、心脏疾病、癌肿、AIDS、自身免疫病、中毒性肝病和中枢神经系统的退行性疾病也是由于特定的神经元细胞发生凋亡而致；与之相反，凋亡被抑制也对身体造成严重的危险。如果自身反应性B细胞和T细胞不能通过凋亡被清楚，就会诱发自身免疫性疾病。癌症也可看作是细胞凋亡异常减少的疾病，肿瘤的净增长就是不断增加的生长速率与不断减少的凋亡速率共同作用的结果。各种抗癌药物、放射都可以触发肿瘤凋亡；肿瘤细胞对凋亡的敏感性受几种癌基因的调控；凋亡可能是癌症治疗的一种预后标志，肿瘤学上所观察到的这些凋亡现象已引起人们广泛而持久的兴趣。

正常细胞凋亡过程中，其细胞膜、细胞质、细胞核、核酸以及凋亡相关蛋白都发生显著变化，和正常或坏死细胞相比具有鲜明特征，因此，根据它们在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以用多种检测方法将三者区别开来。其中Annexin V-FITC/PI双染法可借助流式细胞仪进行定量检测，也可以原位染色的定性检测。因为该方法简单、快捷、可同时区分早期和晚期凋亡，因此是目前检测细胞凋亡和凋亡率的最常用和广泛的方法之一。