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  • Annexin V-EGFP/PI Apoptosis analysis kit
  • Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit
  • 货号: abs50006
    产品说明书
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    货号-规格 货期 价格 数量
    abs50006-20T 现货 ¥504.00
    - +
    abs50006-50T 现货 ¥1050.00
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    产品描述
    描述

        Annexin V-EGFP/PI细胞凋亡检测试剂盒是用EGFP标记了的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生。

        其检测原理为:在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

         另外,本试剂盒中还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被EGFP 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
    产品组分:
    编号 名称 20T 50T
    A Annexin V-EGFP 100ul 250ul
    B PI 100ul 250ul
    C Binding Buffer 5ml 10ml
    使用方法
    1、调整细胞密度到大约1×106 细胞/ml。
    2、将0.2 ml 细胞悬液从细胞培养瓶中(2×105 细胞)转移到干净的离心管内。
    3、室温1000 g 离心5 分钟,去除培养基。
    4、细胞沉淀用0.2 ml 预冷的PBS 溶液轻轻重悬。
    5、室温1000 g 离心5 分钟,去除PBS。
    6、细胞沉淀用0.2 ml 预冷的结合缓冲液(组分C. Binding Buffer)轻轻重悬。
    7、加入5 μl Annexin V-EGFP(组分A),5 μl PI染液(组分B),轻轻混匀。
    8、室温(18-24°C)避光孵育10-15 分钟。
    9、选作,用结合缓冲液或PBS补充体积至0.4 ml。
    10、将样本放置在冰上避光保存,尽快检测。
    11、用流式细胞仪或荧光显微镜检测分析。
    基本信息
    别名
    Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit
    概述
    储存/保存方法
    2-8 ℃避光保存,有效期6个月。
    -20 ℃避光保存,有效期12个月或更久,避免反复冻融。
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
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