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  • 质粒DNA转染试剂盒(贴壁细胞)

    促销商品
    货号: abs60255
    产品说明书
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    货号-规格 货期 价格 数量
    abs60255-0.5ml 现货 ¥1728.00 ¥1037.00
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    abs60255-1.0ml 现货 ¥2928.00 ¥1757.00
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    abs60255-1.5ml 现货 ¥4144.00 ¥2486.00
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    产品描述
    描述
    产品介绍:
    这款产品是在DeofectEU Transfection Reagent的基础上进一步优化研发成功的专门用于质粒DNA细胞转染的转染试剂。它具有非常卓越的转染性能,可高效转染多种贴壁细胞、原代细胞和悬浮细胞,转染效率在贴壁细胞中高达90%以上(EGFP质粒)。它不仅可转染较大分子的质粒DNA,还可转染RNA和小分子DNA。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,它采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后细胞死亡率不到10%。这款产品使用也非常方便,先将转染试剂与质粒DNA混合,再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。
    产品特点:
    1、卓越的细胞转染性能:可高效转染多种贴壁细胞、原代细胞和悬浮细胞,转染效率在贴壁细胞中高达90%以上;
    2、极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响,实验结果更为客观;
    3、操作简便,可用于含血清培养基培养细胞的转染,转染前后不需要更换培养液。
    使用方法

    方法步骤(以24孔板转染为例):

    A、细胞接种:

    1、转染前24小时左右对细胞进行转接,培养过夜;

    2、确保转染时细胞密度为90%左右;

    3、最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。

    B、R /DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):

    1、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,再加入适量的转染

    试剂,见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。

    2、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,加入适量的溶液A,轻轻混匀,再加入适量的DNA,见附表。用移液器再次轻轻混匀后在室温静置5分钟。

    3、将DNA-培养基混合物滴加至R-培养基混合物中,用移液器轻轻混匀后在室温静置15~20分钟后,立即转染。注意: R-培养基混合物和DNA-培养基混合物的混合顺序非常重要,切勿颠倒。

    注意:离心管最好使用聚丙烯离心管。

    C.转染:

    1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。

    2、培养12小时后即可观察,最佳观察或收获时间为24~48小时。

    3、R在完全培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基,请于加入R/DNA复合物12~24小时后进行

    附表:不同培养体系推荐初始转染条件

    培养皿96 孔板48 孔板24 孔板12 孔板6 孔板10cm 皿
    表面积cm20.3511.93.89.659
    培养基、试剂、DNA 量无血清培养基(μl)20501002004002000
    溶液 A (μl)0.4124840
    R (μl)0.51.32.551050
    1μg/μl plasmid (μl)0.160.40.81.63.216
    完全培养基(ml)0.10.250.51210
    储存/保存方法
    -20℃保存,有效期1年,使用前轻轻混匀。
    技术指标
    试剂盒包装
    货 号R溶液 A
    abs60255-0.5ml0.5ml0.40ml
    abs60255-1.0ml1.0ml0.80ml
    abs60255-1.5ml1.5ml1.2ml


    产品用途
    适用细胞系:293T,A549,B16F10,HEK 293,HeLa,Hepa 1-6,Hepa 1cLc7,HepG2,BHK-21,BNL.CL2,BRL-3A,C2C12,C6,CHO-K1,Clone 9,COS-1,COS-7,Daoy,DBTRG-05MG,DI-TNC1,DU 145,HLF-a,Huh-7,K562,KB,KLN 205,Lυ2 (LLC1),NCaP-FGC,MCF-7,MEL,Neuro-2a,NIH3T3,OVCAR3, PC3,PC-12,等。
    注意事项

    注意事项:

    • 转染前的细胞汇合度以90%左右为宜,转染时细胞生长状态应保持良好,不要有支原体污染。
    • 首次转染,建议进行优化实验,如24孔培养板,每孔质粒用量 0.8ug,转染试剂用量可选择2.0ul、2.5ul、3.0ul、3.5ul进行优化。
    • 应避免转染复合物制备体系中存在血清,因血清会干扰R与 DNA形成复合物,培养基中尽量不要使用抗生素。
    • 如果需要稳转,请在转染24-48h后加入筛选培养基。
    • 本试剂主要用于质粒DNA转染,如需质粒DNA、RNA、siRNA均 可转染的试剂,请选择Prime核酸转染试剂。

    注意: 本产品仅用于科研实验

    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
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