T4 DNA Ligase

在有Mg²⁺和ATP存在的条件下，T4 DNA Ligase能催化双链 DNA或RNA上相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化双链DNA的平末端或粘性末端之间的连接，还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻，但不能催化单链 DNA 之间的连接。
酶储存缓冲液：
10 mM Tris-HCl (pH 7.5) ，50mM KCl，1mM DTT， 0.1mM EDTA，50% (v/v) glycerol。
5 × T4 DNA Ligase Buffer
250 mMTris-HCl (pH 7.5)， 50mM MgCl2，50mM DTT， 5mM ATP，连接促进剂。

纯化于携带T4 DNA ligase 基因 的E. coli 菌株。

5U/μl

-20℃保存，有效期12个月。

1、化冻 5×T4 DNA Ligase Buffer 后，需要混匀后再使用。
2、T4 DNA Ligase 最适活性温度为 37℃，但是高温连接形成的连接产物的转化效率会大大降低，所以选用 25℃或 16℃等稍低的连 接温度。如果连接产物不用转化且需要高的连接效果，可以在 37℃条件下进行。
3、该酶需要 Mg 2+为激活剂，因此螯合 Mg 2+的 EDTA 的存在会阻碍连接反应。溶解于高浓度 EDTA 缓冲液的 DNA 需要用灭菌水或 TE 缓冲液进行置换。