产品描述 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
描述 | One-Step RT-PCR Kit一步法RT-PCR试剂盒具有方便、快速、灵敏度高、重复性好等特点。该试剂盒能以动物、植物和微生物的总RNA或mRNA为模板,cDNA合成和PCR反应在一个管中进行,反转录结束后可直接进行PCR循环而不用增加额外的步骤;同时可对低至1fg的总RNA进行扩增,有助于大量样品的处理并减少污染机会。
产品特点: 效率高,可反转录GC含量高,二级结构复杂的RNA模板。 独特的缓冲体系使反转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。 操作简单,可最大限度的避免污染。 实验方法: 1、将 RNA 模板、引物、2×One-Step RT-PCR SuperMix,RT Enzyme Mix 和RNase Free Water 溶解并置于冰上备用。2、配置以下反应体系:
4、常用反应程序:
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储存/保存方法 | -20℃ | ||||||||||||||||||||||||||||||||
注意事项 | 1、本试剂盒PCR扩增延伸时间为1kb/min,客户可根据具体片段长度进行延伸时间的调整。 2、通常情况,28~30个循环可达到最佳扩增,对于低拷贝目的基因的检测,可将循环数增加到40个。 3、如果同时操作多个样品,建议先在冰上先配制预混液,然后再分装到各个反应管中,加入模板启动反应。 4、反应出现目标条带拖带,系模板浓度过高或特异引物浓度不适等原因所致,可对模板及引物浓度等进行调整;反应出现杂带,可对退火温度进行调整,或重新设计特异性高的引物。 5、本试剂盒只需使用特异性反转录引物,无需使用Random Primer和OligodT Primer等进行反转录反应。 6、为了保证反应的正常进行,需使用高质量的RNA模板。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究 |
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