做肺癌研究，第一步就是模型。基因工程模型贵、周期长；移植瘤模型快，却跳过了“从正常细胞一步步癌变”的过程。想在免疫功能正常的小鼠身上看到完整的“增生 → 腺瘤 → 腺癌”，化学诱导是绕不开的路——而这条路上最经典的那款试剂，叫尿烷（Urethane）。

一、为什么是尿烷？

尿烷的致癌机制相当清晰：经肝脏 CYP2E1 代谢激活为乙烯基氨基甲酸酯，再转化为高活性环氧化物，与 DNA 形成加合物，特异性诱导 Kras 第 61 密码子点突变（Q61R / Q61L），启动肺上皮细胞的多阶段癌变。与此同时，肿瘤发生伴随慢性炎症微环境的形成，以及 MDSC 与 M2 型巨噬细胞的招募——这意味着，你要的“分子机制”和“免疫微环境”两条线，一个模型就能跑通。

它还有三个让人省心的优点：腹腔注射即可给药、试剂成本低、成瘤率高且重复性好。敏感品系 A/J 单次低剂量给药，成瘤率就接近 100%。

提醒：尿烷是 IARC 2A 类致癌物，兼有麻醉作用——称量配液请在通风橱或生物安全柜内进行，全程佩戴丁腈手套、护目镜与口罩。

二、选对品系，别抄错方案

A/J（敏感品系）：单次腹腔注射 1 mg/g，约 20 周可见多发性肺腺瘤，24–42 周部分进展为腺癌，成瘤率接近 100%，是化学预防与癌变机制研究的首选。

C57BL/6（较耐受）：每周 1 mg/g，连续 10 周；停药后约 15 周（即首次给药后约 25 周）评估肿瘤形成，成瘤率大于 80%，适合与基因修饰背景（如条件性敲除鼠）匹配的实验。

另外别忘了样本量：化学诱癌的荷瘤数个体间呈泊松分布，每组至少 10 只，否则统计很难做出差异。

三、配液与给药：决定成败的三个细节

1. 配液　以无菌生理盐水配制 100 mg/mL（10%，W/V）溶液，充分搅拌或涡旋至完全溶解，0.22 μm 水系滤器过滤除菌；水溶液易水解，务必现配现用。

2. 换算　给药剂量 1 mg/g 体重，按 10% 浓度即 10 μL/g——20 g 小鼠对应 200 μL，逐只按实际体重称量换算。

3. 操作　25G 针头腹腔注射，进针角度约 30–45°，回抽确认未误入肠道或血管。注射后小鼠嗜睡 1–5 小时属正常麻醉效应，保温监护至完全苏醒即可，每小时巡视一次。

四、验证四维度：一个都不能少

· 大体解剖：灌注固定全肺，Bouin 液固定后肿瘤灶呈白色隆起，体视镜下计数直径大于 0.5 mm 的结节，记录平均荷瘤数、直径分布与成瘤率；

· 组织病理：HE 染色完成肿瘤检出与分型（参照 MMHCC 标准），免疫组化检测 Ki-67、TTF-1 / Napsin A 及巨噬细胞极化标志（F4/80、CD206、Arg-1、iNOS）；

· 分子与免疫：Kras 第 61 密码子测序是确认尿烷来源肿瘤的金标准；流式分析 MDSC、TAM 与 T 细胞亚群；ELISA / qPCR 与 Western Blot 覆盖炎症因子及 PI3K/Akt/mTOR、p-STAT3 等通路；

· 影像学（可选）：micro-CT 活体纵向监测结节数目与体积，同一动物全过程随访，减少动物用量。

一个高频误区：Bouin 液让肿瘤灶对比鲜明、适合表面计数，但长时间浸泡的组织不适合 RNA 提取、部分抗原会被破坏。同一个肺既要计数又要做 qPCR / WB，请只用 4% 多聚甲醛。

五、那些“看起来正常”的坑

· 不成瘤？先查四件事：品系（C57BL/6 单次给药本就难成瘤）、时间（A/J 约 20 周，最早 16 周才可见结节）、溶液（是否现配现用、剂量是否逐只换算）、周龄（6–8 周龄最佳）；

· 注射后死亡？多半是剂量算错、误注入肠道或膀胱，或动物本身状态不佳——双人核对剂量是最省事的防线；

· 组内差异大？泊松分布使然：统一周龄、性别与批次，按实际体重给药，统一计数标准，离散度自然可控。

尿烷造模不难，难在细节的一致性。选一款溶解性好、批间稳定的尿烷，把配液、换算、监护三个环节做扎实，剩下的交给时间。爱必信尿烷（abs816485）肺癌造模专用，提供详细《肺癌造模操作指南》，配套的无菌生理盐水、4% 多聚甲醛、HE 与改良 Masson 三色染色液、TTF-1 / Ki-67 / CD206 等抗体可一站配齐，让模型建立少走弯路。

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货号	品名	主要作用	规格
abs816485	尿烷（ Urethane ）	肺癌模型化学诱导剂	250mg
abs47052148	无菌生理盐水	配制0.9%无菌生理盐水，用于溶解尿烷及腹腔注射。	500g
abs9179	4%多聚甲醛	肺组织固定	500mL
abs90822	Bouin's 固定液	肺组织固定	100mL
abs9217	HE 染色试剂盒	病理染色（肿瘤检出与病理分型）	100mL
abs9348	改良 Masson 三色染色液	间质纤维化与肿瘤间质	50mL×8
abs123999	Rabbit anti-Ki-67 Polyclonal Antibody	肿瘤细胞增殖活性	50μL
abs120238	Rabbit anti-TTF1 Polyclonal Antibody	肺腺癌来源标志	100μL
abs137239	Rabbit anti-F4/80 Recombinant Monoclonal Antibody(313-49)	巨噬细胞总标记	100μL
abs130136	Rabbit anti-iNOS Recombinant Monoclonal Antibody(R131)	巨噬细胞M1 极化	100μL
abs154875	Mouse anti-CD206 Monoclonal Antibody(JMMR-835)	巨噬细胞M2 极化	100μL