1. 蛋白酶K 的活性边界在哪？

货号 abs9118 的蛋白酶K（Proteinase K）由林伯氏白色念珠菌的蛋白酶 K 基因经定点突变、酵母分泌表达、色谱纯化而来，CAS 39450-01-6，分子量约 29.3 kDa，纯度 ≥98%，比活 ≥34 单位/毫克干粉，白色冻干粉，不含细菌内毒素。催化面宽：pH 4 到 pH 12 之间均有活性，反应温度覆盖 0～75℃，切点是脂肪族与芳香族氨基酸羧基端的肽键，等于所有蛋白都能切。0.5% SDS、常用浓度尿素或 EDTA 存在时依然稳定，这三条是它在裂解液里不被灭活的前提。

2. 核酸提取里的酶量怎么定？

官方配液方式是干粉溶于 20 mM Tris-HCl（pH 7.4）、1 mM CaCl2、2% 甘油的稀释缓冲液，0.22 µm 滤器过滤除菌，得 20 mg/ml 母液。Ca2+ 是激活位点，EDTA 会削弱活性，两者不能同时出现在同一管里——磁珠法裂解体系若用 EDTA 体系，酶要后加或换缓冲体系。做基因组或 RNA 提取时，酶量按样本蛋白负荷排梯度，蛋白多、残留高就往 0.2-0.5 mg/ml 靠，并把消化时间拉到 55℃ 30-60 min 这一档；用 RT 灭活而不是高温煮沸，避免核酸降解。

3. 蛋白酶K 能用在哪条线上？

主要应用是基因诊断试剂盒、基因组 DNA 与 RNA 提取试剂盒中去除核酸酶与蛋白污染，工业方向用于提取非蛋白类生物制品核酸与多糖类药物，比如 DNA 疫苗和肝素制备；另有皮肤保健方向用于去除老化角质层细胞、糅皮，以及制备水解蛋白调味品，能替代部分其他蛋白酶。选型时看两点：是否需要无内毒素（细胞下游表达实验必须选无内毒素版本），以及是否需要广谱切位点。

4. 备料与储存怎么安排？

配好的 20 mg/ml 母液分装 -20℃ 冷冻，避免反复冻融导致活力衰减；粉末室温保存有效期2 年，4℃ 3 年，-20℃ 5 年，温度越低越耐存。冻干粉开瓶后按实际用量分装，别整瓶反复开合吸潮。规格有 100 mg 现货与 1 g（货期 6-8 周），大批量提取按 1 g 档排期更省成本；该货号同时是新货号，对应旧号 abs47020076。酶活高、稳定性好，操作时避免交叉污染。

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