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小爱实验Tips：WB实验之抗体验证

时间：2019-08-19 点击次数：4522

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验证抗体对于实验结果的一致性和重复性是至关重要的，即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白，并且抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。

WB实验常规用于定性和半定量研究，也有一些高分文章利用信号和靶蛋白量成很好的线性关系进行定量WB研究，如果没有进行良好的抗体验证，包括验证荧光信号与蛋白量的良好线性关系，自然就无法获得下游定量分析所要求的准确性和精确性。

目前国际抗体验证工作组建议的抗体验证方法主要包括以下几种：

1）遗传方法

使用CRISPR-Cas9或RRNAi技术在实验组和对照组中进行敲除或敲低实验，然后使用特异性抗体测定目标蛋白的荧光信号。

2）正交方法

这种方法使用质谱法来量化几个蛋白样品的靶信号，然后同WB方法在同样样本中的量化信号值进行比较、得到其相关性。

3）独立抗体方法

使用针对相同靶点的两种不同抗体是测量抗体特异性的直观且有效的方法。通过比较2种抗体检测到多个样本的量化信号值、确定其相关性。

4）表达带标签的蛋白

此方法通过表达带亲和标签（如FLAG、v5等）或荧光蛋白（如GFP、YFP等）的蛋白质来验证抗体。通过比较抗体和标签抗体检测到的量化信号值、进而分析确定其相关性。

爱必信生物作为高品质生命科学产品的中国品牌，可提供全面优质的二抗及标签抗体产品。

二抗：

货号	产品名称	规格	价格
abs20039	goat anti-mouse IgG-HRP	500ul	600
abs20040	goat anti-rabbit IgG-HRP	500ul	600
abs20001	goat anti-mouse IgG-HRP	500ul	1200
abs20002	goat anti-rabbit IgG-HRP	500ul	1200
abs20003	Goat anti-Mouse IgG-FITC	100ul	300
abs20004	Goat anti-Rabbit IgG-FITC	100ul	300
abs20005	Rabbit anti-Goat IgG-HRP	500ul	1200
abs20006	Rabbit anti-Goat IgG-FITC	100ul	300

标签抗体：

货号	产品名称	规格	价格
abs830001	Anti- GST 抗体	50ul	800
abs830002	Anti- His Tag抗体	50ul	800
abs830003	Anti- His(C-terminal Specific) 抗体	50ul	800
abs830004	Anti- Myc 抗体	50ul	800
abs830005	DDDDK epitope tag antibody	50ul	800
abs830006	Anti- HA 抗体	50ul	800
abs830008	Anti-V5,mAb	50ul	800
abs830010	Anti- GST (HRP) 抗体	50ul	1000
abs830011	Anti- His Tag (HRP) 抗体	50ul	1000
abs830012	Anti- His(C-terminal Specific) (HRP) 抗体	50ul	800
abs830013	Anti- Myc (HRP) 抗体	50ul	1000
abs830014	DDDDK epitope tag antibody	50ul	1000
abs830015	Anti- HA (HRP) 抗体	50ul	1000
abs830016	Anti- V5 (HRP) 抗体	50ul	1000

WB更多配套试剂推荐：

实验步骤	推荐指数	货号	产品名称	规格
样本制备		abs9228	RIPA (中)	100ml
		abs9229	RIPA (强)	100ml
		abs9230	RIPA (弱)	100ml
		abs9231	RIPA (强，无抑制剂)	100ml
		abs9160	NP-40	100ml
		abs9195	1M Tris-HCl，pH6.8	1L
		abs9201	1M Tris-HCl，pH8.8（更多pH请看官网）	1L
		abs9117	SDS	100ml
	★★	abs9116	WB/IP 细胞裂解液	100ml
	★★	abs9239	WB/IP 细胞裂解液(无抑制剂)	100ml
	★★★★	abs9101	红细胞裂解液	100ml,250ml,500ml
		abs812852	PMSF	50mg,100mg,200mg
		abs816442	Aprotinin 抑肽酶	10mg,25mg,50mg,100mg
		abs817902	Peptatin 胃蛋白酶抑制剂A	10mg,25mg,50mg,100mg
		abs9133	EDTA	100ml
		abs42017684	EGTA	1g,10g
		abs817431	原钒酸盐	100mg,500mg
		abs47014865	β-甘油磷酸盐	10g,25g
	★★	abs9161	广谱型蛋白酶抑制剂混合物	1ml
	★★	abs9162	广谱型磷酸酶抑制剂混合物	1ml
蛋白定量	★★	abs9232	BCA蛋白定量试剂盒	500次,2500次
蛋白定量	★★	abs9233	增强型BCA 蛋白定量试剂盒	500次
上样与电泳		abs9226	DTT溶液(1mol/L)	5ml,10ml
		abs9237	2X Laemmli样品缓冲液	5ml*2
		abs9238	10%SDS十二烷基硫酸钠溶液	500ml
	★★	abs953	2*上样缓冲液 (适用于SDS-PAGE)	10ml
	★★	abs9301	预制胶 10%,10 wells	5片/盒
	★★	abs9308	预制胶 10%,15 wells	5片/盒
	★★	abs9302	预制胶 12%,10 wells	5片/盒
	★★	abs9309	预制胶 12%,15 wells	5片/盒
		abs9303	预制胶 15% ,10 wells	5片/盒
		abs9310	预制胶 15% ,15 wells	5片/盒
		abs9304	预制胶 4-15%, 10 wells	5片/盒
		abs9311	预制胶 4-15%, 15 wells	5片/盒
	★★	abs9305	预制胶 4-20%, 10 wells	5片/盒
	★★	abs9312	预制胶 4-20%, 15 wells	5片/盒
		abs9307	预制胶 8%, 15 wells	5片/盒
		abs9306	预制胶 8-20%, 10 wells	5片/盒
		abs9313	预制胶 8-20%, 15 wells	5片/盒
	NEW	abs9328	3-5kd小分子量预制胶，16.5%，10wells	10片/盒
	NEW	abs9329	3-5kd小分子量预制胶，16.5%，15wells	10片/盒
	★★★	abs925	蛋白电泳套装	盒
		abs951	running buffer	100ml,1L
	★★★★★	abs923	预染蛋白marker, 10-245 KDa	500ul,5*500ul
	★★★★★	abs924	预染蛋白marker, 10-180 kDa	250ul,2*250ul
		abs966	Genshare考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液	500ml
	★★★	abs964	考马斯亮蓝染色试剂盒(常规型)R250	1kit
		abs965	考马斯亮蓝染色试剂盒(增强型)G250	1kit
转膜		abs931	PVDF膜0.2 μm	20张
	★★	abs932	PVDF膜0.45 μm	20张
	★★	abs959	NC膜0.2 μm	20张
		abs960	NC膜0.45 μm	20张
		abs950	10*电转液	100ml,1L
封闭		abs9174	脱脂奶粉	100g,500g
封闭	★★★★★	abs9155	BSA	50g,100g
一抗孵育	★★	abs830031	Beta actin antibody	50ul,100ul
		abs132001	Beta actin antibody	50ug,100ug
		abs119600	Beta Actin Polyclonal Antibody	50ul,100ul
		abs132184	Beta-Actin antibody	50ug,100ug
		abs137975	Beta-Actin Mouse Monoclonal Antibody	50ug,100ug
	★★	abs830030	GAPDH antibody	50ul,100ul
		abs132004	GAPDH antibody	50ug,100ug
		abs137959	GAPDH Mouse Monoclonal Antibody	50ug,100ug
		abs118936	GAPDH Polyclonal Antibody	50ul,100ul
		abs131993	Tubulin alpha Antibody	50ug,100ug
	★★	abs830032	Tubulin Beta antibody	50ul,100ul
		abs131994	Tubulin beta Antibody	50ug,100ug
		abs125209	Tubulin Beta Polyclonal Antibody	50ul,100ul
二抗孵育	★★	abs20001	Goat anti-mouse IgG-HRP	100ul,500ul,1ml
	★★	abs20002	Goat anti-rabbit IgG-HRP	100ul,500ul,1ml
	★★	abs20003	Goat anti-Mouse IgG-FITC	1ml,500ul,100ul
	★★	abs20004	Goat anti-Rabbit IgG-FITC	100ul,500ul,1ml
	★★	abs20005	Rabbit anti-Goat IgG-HRP	100ul,500ul,1ml
一抗孵育		abs830001	Anti- GST	50ul,100ul
		abs830002	Anti- His Tag抗体	50ul,100ul
		abs830003	Anti- His(C-terminal Specific) 抗体	50ul,100ul
		abs830004	Anti- Myc 抗体	50ul,100ul
		abs830005	Anti- DYKDDDDK	50ul,100ul
		abs830006	Anti- HA 抗体	50ul,100ul
		abs830008	Anti-V5,mAb	50ul,100ul
		abs830010	Anti- GST,HRP	50ul
		abs830011	Anti- His Tag (HRP) 抗体	50ul
		abs830012	Anti- His(C-terminal Specific) (HRP) 抗体	50ul
		abs830013	Anti- Myc (HRP) 抗体	50ul
		abs830014	Anti- DYKDDDDK,HRP	50ul
		abs830015	Anti- HA (HRP) 抗体	50ul
		abs830016	Anti- V5 (HRP) 抗体	50ul
		abs137956	C-Myc-Tag Mouse Monoclonal Antibody	50ug,100ug
		abs137958	Flag-Tag Mouse Monoclonal Antibody	50ug,100ug
显色	★★★★★	abs920	ECL化学发光检测试剂盒	225ml,250ml,2*250ml
		abs9212	DAB 显色试剂盒（棕黄色，WB）	1kit
		abs9213	DAB 显色试剂盒（紫蓝色，WB）	1kit
其他辅助试剂		abs952	10*TBST	100ml,1L
		abs9152	Tween-20	500ml
	★★	abs954	WB专用一抗二抗稀释液	100ml
		abs969	Western一抗二抗去除液（中性）	250ml
		abs968	Western一抗二抗去除液（弱碱性）	250ml
		abs967	Western一抗二抗去除液（强碱性）	250ml
新手必备	★★★★★	abs926	WB solution base kit（rabbit）	1kit
	★★★★★	abs927	WB solution base kit（mouse）	1kit
	★★★★★	abs928	WB solution base kit（goat）	1kit

Absin特色产品线：
WB相关：ECL发光液、预染marker、预制胶；IHC相关：二抗试剂盒、组化笔；IP/CoIP试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；ELISA试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

爱必信(上海)生物科技有限公司

联系邮箱：info@absin.cn

公众平台：爱必信生物

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