首页 产品中心
  • PM原代细胞小核酸转染试剂

    促销商品
    货号: abs60253
    产品说明书
    分享:
    货号-规格 货期 价格 数量
    abs60253-0.5ml 现货 ¥2528.00 ¥1517.00
    - +
    abs60253-1.0ml 现货 ¥4512.00 ¥2707.00
    - +
    abs60253-1.5ml 现货 ¥6432.00 ¥3859.00
    - +
    大包装询价
    产品描述
    描述
    产品介绍:
    这款PM原代细胞小核酸转染试剂是专门用于原代细胞小核酸转染的试剂,它是在小核酸转染试剂基础上进行改良而成的。它可用来转染siRNA、miRNA mimics、miRNA inhibitor等200bp以内的小分子RNA,可转染绝大多数原代细胞。目前,无论国外还是国内,原代细胞的核酸转染都是个热点难题,市场还缺乏真正有效的商品化的原代细胞核酸转染试剂。它能够高效转染绝大多数原代细胞,获得比较理想的基因敲除效果。甚至对一些活体寄生虫幼虫,它也能获得较为理想的转染结果。对于大多数原代细胞,这款产品的细胞转染阳性率都在80%以上,而转染细胞死亡率不到10%。这款产品使用非常便捷,先将sRNA与该试剂室温混合,再将它们的混合物直接加入含培养基的细胞,血清对转染效果没有影响,不必刻意添加或更换培养液

    产品特点:

    1、卓越的原代细胞转染性能:细胞转染阳性率一般在80%以上,基因敲除效果明显,肝细胞Lamin A/C 基因敲除效率在95%以上;
    2、极低的细胞毒性:转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响;
    3、转染细胞范围广,绝大多数原代细胞都能获得比较理想的转染结果。
    4、减轻操作繁琐程度:无需特意使用Opti-MEM Medium,无需4小时换液,无换液等待之苦,血清不影响转染结果
    应用
    siRNA 转染;miRNA mimics 转染;200bp 内的小分子 RNA 转染
    使用方法
    操作步骤:
    本说明书适用于24孔培养板的转染实验,其他规格的培养板的用量参照下面表格,表格给出的是每孔的用量与体积。
    A. 细胞接种:转染前一天接种细胞,每孔500 μl培养基,使细胞在转染时密度在30-50%,尽量不要使用抗生素。
    B. siRNA-PM混合物准备:
    1、12pmol siRNA 用50μl无血清培养基稀释。
    2、2μl PM用50μl无血清培养基稀释。轻轻混匀,室温孵育5min。注意:确保在25 min内执行第三步操作,不要过于延迟。
    3、孵育5min后,将siRNA 稀释液与PM稀释液混合(总体积100μl)。轻轻混匀,室温孵育20 min。
    C. 将混合物加到培养的细胞内(完全培养基培养):
    1、将100μl混合物加入培养孔内,培养孔内含有0.5ml培养的细胞。轻轻晃动培养板,混匀。
    2、37°C培养18-72h,检测基因抑制效果。如果需要,细胞培养4-6h时可以更换培养基,但不是必须。孵育时间的长短,取决于细胞类型、所干扰基因本身及分析方法。可设置不同的孵育时间进行实验以确定最佳孵育时间。

    转染实验优化:
    为了提高转染效率,最好对转染条件进行优化,特别是首次使用。例如:24孔培养板,siRNA用量在6、12、18、24、30 pmol (final concentration 10- 50 nM)之间调整,SP试剂用量在1.0 - 3.0μl之间调整。

    转染实验要点:

    1、转染过程尽量不要使用抗生素,否则会导致细胞死亡增加;
    2、首次实验siRNA的用量设置在终浓度10nM、20nM、30nM、40nM、50 nM进行摸索 ,后续实验根据实验结果修改。
    储存/保存方法
    短期4°C 保存,超一个月-20°C 储存,避免反复冻融,有效期 1年
    技术指标
    Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels
    Culture vesselSurfacearea/well
    (cm2)
    Vol. of growth medium(μl)Vol. of dilution medium(μl)siRNA Amount
    (pmol)
    PM原代小核酸转染试剂(μl)
    96-well0.31002 x 102.40.4
    48-well0.82502 x 2561
    24-well25002 x 50122
    12-well410002 x 100244
    6-well1025002 x 2506010
    产品用途
    适用于Clone 9(大鼠肝细胞),HUVEC(人脐静脉原代内皮细胞),原代血管平滑肌细胞,大鼠原代心肌细胞,Primary Human Fibroblasts(人原代成纤维细胞),大鼠骨髓间充质干细胞,MSC(间充质干细胞),BE(2)C(人神经母细胞瘤细胞),MRC-5(人胚胎成纤维细胞),NIH3T3(小鼠胚胎成纤维细胞),B16F10(小鼠黑色素瘤高转移细胞),BNL.CL2(小鼠胚胎肝细胞),C6(大鼠神经胶质瘤细胞),神经元细胞等。
    注意事项
    本产品经严格的质量检验证明,无生物污染,注意: 本产品仅用于科研实验
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
      0张,还能上传 8 提交
          提示: 尊敬的客户您好,如果您对我们的产品有什么疑问或想要了解的,可以点击“我要提问”按钮填写您的疑问。
          提交不成功?请联系info@absin.cn。
          我要提问

      促销资讯 更多

        订购信息
        您可以从我们的授权经销商处购买absin产品或获得技术支持。若要查看您所在地区的经销商,请从以下的下拉列表中选择。
        GO
        • 0