PM原代细胞小核酸转染试剂
促销商品货号: abs60253
货号-规格 | 货期 | 价格 | 数量 |
abs60253-0.5ml | 现货 | - + | |
abs60253-1.0ml | 现货 | - + | |
abs60253-1.5ml | 现货 | - + |

产品描述 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
描述 | 产品介绍: 这款PM原代细胞小核酸转染试剂是专门用于原代细胞小核酸转染的试剂,它是在小核酸转染试剂基础上进行改良而成的。它可用来转染siRNA、miRNA mimics、miRNA inhibitor等200bp以内的小分子RNA,可转染绝大多数原代细胞。目前,无论国外还是国内,原代细胞的核酸转染都是个热点难题,市场还缺乏真正有效的商品化的原代细胞核酸转染试剂。它能够高效转染绝大多数原代细胞,获得比较理想的基因敲除效果。甚至对一些活体寄生虫幼虫,它也能获得较为理想的转染结果。对于大多数原代细胞,这款产品的细胞转染阳性率都在80%以上,而转染细胞死亡率不到10%。这款产品使用非常便捷,先将sRNA与该试剂室温混合,再将它们的混合物直接加入含培养基的细胞,血清对转染效果没有影响,不必刻意添加或更换培养液 产品特点: 1、卓越的原代细胞转染性能:细胞转染阳性率一般在80%以上,基因敲除效果明显,肝细胞Lamin A/C 基因敲除效率在95%以上; 2、极低的细胞毒性:转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响; 3、转染细胞范围广,绝大多数原代细胞都能获得比较理想的转染结果。 4、减轻操作繁琐程度:无需特意使用Opti-MEM Medium,无需4小时换液,无换液等待之苦,血清不影响转染结果 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
应用 | siRNA 转染;miRNA mimics 转染;200bp 内的小分子 RNA 转染 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
使用方法 | 操作步骤: 本说明书适用于24孔培养板的转染实验,其他规格的培养板的用量参照下面表格,表格给出的是每孔的用量与体积。 A. 细胞接种:转染前一天接种细胞,每孔500 μl培养基,使细胞在转染时密度在30-50%,尽量不要使用抗生素。 B. siRNA-PM混合物准备: 1、12pmol siRNA 用50μl无血清培养基稀释。 2、2μl PM用50μl无血清培养基稀释。轻轻混匀,室温孵育5min。注意:确保在25 min内执行第三步操作,不要过于延迟。 3、孵育5min后,将siRNA 稀释液与PM稀释液混合(总体积100μl)。轻轻混匀,室温孵育20 min。 C. 将混合物加到培养的细胞内(完全培养基培养): 1、将100μl混合物加入培养孔内,培养孔内含有0.5ml培养的细胞。轻轻晃动培养板,混匀。 2、37°C培养18-72h,检测基因抑制效果。如果需要,细胞培养4-6h时可以更换培养基,但不是必须。孵育时间的长短,取决于细胞类型、所干扰基因本身及分析方法。可设置不同的孵育时间进行实验以确定最佳孵育时间。 转染实验优化: 为了提高转染效率,最好对转染条件进行优化,特别是首次使用。例如:24孔培养板,siRNA用量在6、12、18、24、30 pmol (final concentration 10- 50 nM)之间调整,SP试剂用量在1.0 - 3.0μl之间调整。 转染实验要点: 1、转染过程尽量不要使用抗生素,否则会导致细胞死亡增加; 2、首次实验siRNA的用量设置在终浓度10nM、20nM、30nM、40nM、50 nM进行摸索 ,后续实验根据实验结果修改。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
储存/保存方法 | 短期4°C 保存,超一个月-20°C 储存,避免反复冻融,有效期 1年 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
技术指标 |
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产品用途 | 适用于Clone 9(大鼠肝细胞),HUVEC(人脐静脉原代内皮细胞),原代血管平滑肌细胞,大鼠原代心肌细胞,Primary Human Fibroblasts(人原代成纤维细胞),大鼠骨髓间充质干细胞,MSC(间充质干细胞),BE(2)C(人神经母细胞瘤细胞),MRC-5(人胚胎成纤维细胞),NIH3T3(小鼠胚胎成纤维细胞),B16F10(小鼠黑色素瘤高转移细胞),BNL.CL2(小鼠胚胎肝细胞),C6(大鼠神经胶质瘤细胞),神经元细胞等。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
注意事项 | 本产品经严格的质量检验证明,无生物污染,注意: 本产品仅用于科研实验 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究 |
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