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  • 小核酸转染试剂

    促销商品
    货号: abs60252
    产品说明书
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    货号-规格 货期 价格 数量
    abs60252-0.5ml 现货 ¥1728.00 ¥1037.00
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    abs60252-1.0ml 现货 ¥2928.00 ¥1757.00
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    abs60252-1.5ml 现货 ¥4144.00 ¥2486.00
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    产品描述
    描述
    产品介绍:
    这款小核酸转染试剂是一种新型的小核酸转染试剂。它可用来转染siRNA、miRNA mimics、miRNA inhibitor 等200bp以内的小分子RNA,转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞,如一般细胞株、肿瘤细胞株等。目前,无论国外还是国内,转染试剂的主要成分均为脂质体或聚乙烯亚胺(Polyethylenimine, PEI),这两种成分都具有很大的细胞毒性,并且转染效果不好。它采用新型的动物源性的纳米材料,毒性很低并且拥有非常卓越的转染性能。与其它品牌的小核酸转染试剂相比,它的细胞转染阳性率一般在90%以上,Lamin A/C 基因抑制效率在95%以上,而其它品牌转染试剂的细胞转染阳性率一般不超过70%,Lamin A/C 基因抑制效率不超过75%。该细胞毒性很低,转染细胞死亡率不到10%,而其它品牌试剂的转染细胞死亡率一般在30%以上。血清对转染效果没有影响,不必刻意添加或更换培养液。本产品适用于细胞株转染,原代细胞转染,请选择PM小核酸转染试剂。

    产品特点:

    1、卓越的细胞转染性能:细胞转染阳性率高达90%以上,基因敲除效果明显,A549细胞Lamin A/C 基因敲除效率在95%以上;
    2、极低的细胞毒性:转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响;
    3、转染细胞范围广,绝大多数贴壁细胞株都能获得比较理想的转染结果
    4、减轻操作繁琐程度:无需特意使用Opti-MEM Medium,无需4小时换液,无换液等待之苦,血清不影响转染结果
    使用方法
    操作步骤:
    本说明书适用于24孔培养板的转染实验,其他规格的培养板的用量参照下面表格,表格给出的是每孔的用量与体积。
    A.细胞接种:转染前一天接种细胞,每孔500 μl培养基,使细胞在转染时密度在30-50%,尽量不要使用抗生素。
    B.siRNA-混合物准备:
    1、12pmol siRNA 用50μl无血清培养基稀释。
    2、2μl 用50μl无血清培养基稀释。轻轻混匀,室温孵育5min。注意:确保在25 min内执行第三步操作,不要过于延迟。
    3、孵育5min后,将siRNA 稀释液与 稀释液混合(总体积100μl)。轻轻混匀,室温孵育20 min。
    C. 将混合物加到培养的细胞内(完全培养基培养):1.将100μl混合物加入培养孔内,培养孔内含有0.5ml培养的细胞。轻轻晃动培养板,混匀。2.37°C培养18-72h,检测基因抑制效果。如果需要,细胞培养4-6h时可以更换培养基,但不是必须。孵育时间的长短,取决于细胞类型、所干扰基因本身及分析方法。可设置不同的孵育时间进行实验以确定最佳孵育时间。

    转染实验优化:
    为了提高转染效率,建议对转染条件进行优化,特别是首次使用。例如:24孔培养板, siRNA用量在6、12、18、24、30 pmol (final concentration 10- 50 nM)之间调整,SP试剂用量在1.0 - 3.0μl之间调整。

    转染实验要点:

    1、转染过程尽量不要使用抗生素,否则会导致细胞死亡增加;
    2、首次实验siRNA的用量设置在终浓度10nM、20nM、30nM、40nM、50 nM进行摸索 ,后续实验根据实验结果修改。
    储存/保存方法
    短期4°C 保存,超一个月-20°C 储存,避免反复冻融,有效期 1年
    技术指标
    Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels
    Culture vesselSurface area/well
    (cm2)
    Vol. of growth medium
    (μl)
    Vol. of dilution medium
    (μl)
    siRNA Amount
    (pmol)
    小核酸转染试剂
    (μl)
    96-well0.31002 x 101.40.4
    48-well0.82502 x 2561
    24-well25002 x 50122
    12-well410002 x 100244
    6-well1025002 x 2506010
    产品用途
    适用于293T(人肾上皮细胞),A549(人肺癌细胞),HEK 293(人胚肾细胞),HeLa(人宫颈癌细胞),MCF-7(人乳腺癌细胞),HepG2(人肝肿瘤细胞),HT-1080(人纤维肉瘤),HLF-a(人肺细胞),Huh-7(人肝癌细胞),KB(人口腔表皮样癌细胞),PC3(人前列腺癌细胞),BRL-3A(大鼠正常肝细胞),DU 145(人前列腺癌细胞),Hepa 1-6(小鼠肝癌细胞),OVCAR3(人卵巢癌细胞),NCaP-FGC(人前列腺癌细胞),C2C12(成肌细胞),MDCK(犬肾细胞),CHO-K1,islk.219细胞(人肺癌细胞),HT-29(人结肠癌细胞),NCI-H1688(人典型小细胞肺肿瘤/癌细胞),RKO结肠癌细胞,Vero(非洲绿猴肾细胞),COS-1(非洲绿猴肾成纤维细胞),COS7-L(非洲绿猴肾成纤维细胞),COS-7(非洲绿猴肾成纤维细胞),SK-BR3(人乳腺癌细胞),Hepa 1cLc7(鼠肝癌细胞),Daoy(人髓母细胞瘤细胞),DBTRG-05MG(人脑胶质母细胞瘤细胞),KLN 205(鼠肺磷癌细胞),Neuro-2a(小鼠神经瘤母细胞),DI-TNC1(大鼠脑间质细胞)等。
    注意事项
    本产品经严格的质量检验证明,无生物污染,注意: 本产品仅用于科研实验
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
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