产品描述 | |
描述 | 组织冻存试剂盒及其配套产品可实现组织活性的长期高效保存,可有效维持组织的形态特征和功能。 |
使用方法 | 组织冻存流程: 清洗、处理组织→玻璃化液 1、2、3→液氮玻璃化→储存 必备材料: 1、组织切片模具(abs9486)1 个及配套刀片(abs9487)3~5 片 2、无菌纱布 1 片 3、秒表或计时器 1 个 4、液氮 250ml 及液氮杯 1 个 5、直头镊小号(11 厘米左右)和中号(16 厘米左右)各 1 把 6、2~8℃冰箱 7、60mm 或 100mm 培养皿若干 8、基础培养基 可能需要的材料: 1、眼科剪和眼科镊 2、含双抗的生理盐水或 PBS 缓冲液 操作步骤: (1)检查组织,确定待处理和冻存的部位,清除坏死、多余组织及残余的血块、粘膜。如有血液,应用生理盐水或 PBS 冲洗净,如标本为结直肠癌或皮肤癌,应充分冲洗以避免可能的微生物污染。 (2)使用 abs9486 和 abs9487 将组织切成 1mm 厚的组织片,若某些组织松散呈糜烂状切成 1mm 不容易保持形态完整,可切成 2mm 厚。 (3)选取形态较完整的组织片浸入 V1 溶液中处理 8min,在 4min 时上下轻轻颠倒混匀 3~5 次。 (4)将 V1 溶液倒入培养皿中,再将组织片轻柔移入 V2 溶液中处理 8min,在 4min 时上下轻轻颠倒混匀 3~5 次。 (5)将 V2 溶液倒入培养皿中,再将组织片轻柔移入 V3 溶液中处理 10min,在 5min 时上下轻轻颠倒混匀 3~5 次。 注意:V3 溶液处理结束后,组织片沉降于管底或半悬浮于 V3 溶液中。如果组织漂浮于 V3 液面上,说明组织片中非细胞成分较多,可在 V1、V2、V3 处理期间增加颠倒混匀的次数。 (6)将 V3 溶液倒入培养皿中,将组织支架平铺于无菌纱布上。 (7)将组织片移到组织支架上,平铺组织片,避免重叠和折叠,在纱布上吸去多余液体。 (8)将组织支架快速浸入液氮,静置至少 5min。 注意:在组织支架移入组织冻存管前,检查组织切片是否透明,透明的组织切片意味着组织切片成功被玻璃化。 (9)拧开冻存管盖,用中号直头镊夹紧冻存管半进入液氮预冷 10 秒后,快速将组织支架移入冻存管内,旋上管盖。 (10)将冻存管移入液氮罐中长期保存。 |
基本信息 | |
储存/保存方法 | 2-8°C保存,有效期12个月。 |
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究 |
- 实验方法 实验条件
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