小鼠皮肤组织单细胞样本制备解决方案-爱必信（absin）官网

单细胞样本制备—小鼠皮肤组织

技术介绍

实验前准备
样本取材及预处理
组织解离步骤
流式结果展示

实验前准备

组织样本处理-所用全套试剂耗材

样本取材及预处理

1、对小鼠实施安乐死，在皮毛线以上部位的基部截断耳部；

2、在无菌培养皿表面放置耳组织，使用镊子在组织上划线去除多余毛发，用弯头镊子将耳组织沿背腹方向切开，分成2部分-背侧和腹侧。

3、将皮肤组织（100mg）加入含有解离液200μL的5mL离心管中，用细剪将皮肤组织切成极小碎片，直至形成糊状物；

组织解离步骤

组织消化解离

1、向离心管中再加入8mL组织解离液，涡旋混匀后放入水平摇床中，37℃，120转/分钟，消化90分钟；

2、后向试管中加入40 μL的5MEDTA溶液（abs9133）终止消化，涡旋混合后继续孵育10分钟（37℃，120转/分钟）；
3、消化完成后取出离心管，将滤液和破碎组织通过无菌70 μm 细胞筛过滤至新的50mL离心管中，并使用5mL的1xPBS缓冲液（abs962）冲洗装过滤液的离心管并过滤，获得细胞悬液；
4、将细胞悬液在4℃条件下，400×g离心5分钟，弃去上清液。
5、使用适量1xPBS缓冲液（abs962）重悬细胞沉淀，可以用于后续分析。

流式结果展示

小鼠皮肤组织单细胞悬液染色结果（abs50227）