单细胞样本制备—小鼠脂肪组织
技术介绍
- 实验前准备
- 样本取材及预处理
- 组织解离步骤
- 流式结果展示
实验前准备
组织样本处理-所用全套试剂耗材样本取材及预处理
组织解离步骤
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1、酶消化:将组织块(约100-200mg)转移至离心管,加入 1 mL 组织解离液(难消化可延长)。
2、摇床孵育:将离心管放置37℃,120 rpm的水平摇床中消化60 min;
3、消化完成后取出离心管,将滤液和破碎组织通过无菌70 μm 细胞筛过滤至新的50 mL离心管中,并使用10 mL的1xPBS缓冲液(abs962)冲洗装过滤液的离心管并过滤,获得细胞悬液;
4、将细胞悬液在4℃条件下,400 xg离心5min,轻柔吸出并弃去脂肪细胞及上清。
5、将获得的细胞沉淀重悬适量的1xPBS缓冲液(abs962)中,得到的细胞悬液可用于后续实验操作。
流式结果展示
小鼠脂肪组织单细胞悬液染色结果(abs50228)
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