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  • Site-directed Mutagenesis Kit

    货号: abs60097
    产品说明书
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    货号-规格 货期 价格 数量
    abs60097-10T 1-2周 ¥809.00
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    产品描述
    描述
    本试剂盒采用反向PCR(Inverse PCR)技术,对含有目标基因的双链环状质粒进行扩增,直接导入突变序列,从而实现单个或多个邻近碱基的突变(mutation)、缺失(deletion)、或插入(insertion)。首先以甲基化的质粒DNA为模板,使用人工合成含有目的突变碱基的引物进行扩增反应,然后用DpnI限制性内切酶消化不含突变的质粒模板,再进行转化和筛选。
        本试剂盒使用的 Enzyme及其配套buffer能够最大限度地保持扩增质粒的保真性,对引物设计的要求相对宽松、灵活,最多可实现21个连续碱基的插入或删除。该方法操作简单快捷,突变阳性率高,严格按说明书操作,6个以下连续碱基的突变率可达90%以上。
        本试剂盒适用于≤6 kb质粒的点突变。对于6 kb以上的质粒,推荐使用我公司的abs60099.html" data-v-6936776b="">XL Site-directed Mutagenesis Kit(abs60099)。对于非甲基化的质粒(例如从大肠杆菌JM110或SCS110菌株中提取的质粒),可通过转化dam+ 的大肠杆菌菌株(如DH5α、TOP10、JM109、XL1-Blue等),再抽提获得甲基化的质粒作为PCR反应模板。
        本试剂盒提供一个4.5 kb、含有突变的lacZ基因的对照质粒(Control Plasmid)。质粒转化大肠杆菌后在含Amp、IPTG和X-gal的琼脂平板上呈白色菌落;采用试剂盒提供的Control Primers成功进行突变反应后,菌落呈现蓝色,可据此检测突变效率。
    产品信息:
    组分规格
    Enzyme8ul
    10 x  Reaction Buffer100ul
    High-GC Additive30ul
    dNTPs25ul
    Dpn I (10 U/ul)12ul
    Control Plasmid (5 ng/ul)10ul
    Control Primers (10 uM of each)10ul
    ddH2O1ml

    注意:除Buffer和ddH2O外,其他组分使用前请先短暂离心;10 x  Reaction Buffer使用前请完全解冻并充分混匀。
    储存/保存方法
    -20℃保存,保质期12个月。
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
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