无血清细胞冻存液plus

爱必信的无血清细胞冻存液采用独特配方用于维持细胞存活的微环境，该产品成分明确，无血清无蛋白组分，无需程序降温，可一步实现细胞冻存，保护细胞免受冰晶和溶质损伤，可有效提高细胞复苏活率和活力。适用于干细胞、免疫细胞等多种细胞的冷冻保存。
产品特点：
成分明确，无血清，无动物源组分，安全性高。
即取即用，无需配制。
无需程序降温，一步实现细胞冻存。

DMSO含量：10%
内毒素：< 1 EU/ml

准备细胞：
1、检查并确认细胞没有真菌、细菌、支原体污染。
2、冻存前的细胞处于增殖旺盛的对数生长期最佳。
3、计数待冻存的细胞数量。悬浮细胞应 180g 离心 5~10min 后除去培养基，贴壁细胞应消化后计数，再 180g 离心除去培养基以获得细胞沉淀。

细胞冻存：
1、首先确定细胞适宜的冻存密度和体积，计算应使用的本冻存液体积。
注意：可使用的冻存密度为 1~10×10⁶ /ml，推荐冻存密度为 2~5×10⁶ /ml。冻存体积为 0.5~1ml/管。
2、吸取适量冻存液重悬细胞，使用前产品应当 2~8℃预冷。细胞重悬后应当立即分装至细胞冻存管。
3、经冻存液重悬后的细胞不能在室温或 2~8℃静置超过 10 min 以上，应当尽快将冻存管移入-80℃低温冰箱，不采取任何程序降温措施或使用程序降温装置。如果无法立即移入-80℃低温冰箱，至少应当先移入低于 0℃环境中（如-20℃冰箱）短暂存放 10 min 左右，同样不采取程序降温。
4、-80℃冰箱过夜后的冻存管，若长期储存，可移入液氮罐中保存。若短期取用，可于-80℃短期保存数月，保存时间、效果因细胞类型而不同。
注意：初次使用本产品冻存的细胞类型，应测试保存时间和效果后再使用。

细胞复苏：
1、先准备室温或 37℃预温好的完全培养基，其体积为冻存液体积的 9 倍。
2、取出液氮或-80℃中的冻存管，置于 37℃水浴并不断轻摇。待剩余 1 粒米大小的冰块时，迅速移出水浴。
3、立即吸取冻存液至完全培养基中，轻柔吹打 3~5 次混匀。然后，180g 离心 5~10 分钟，获得细胞沉淀备用。
4、加入适量新鲜培养基，使用移液管缓慢悬浮细胞，并将细胞转染细胞培养皿/瓶中，显微镜下观察细胞状态，放入细胞培养箱中培养。
5、24h 后观察细胞状态，并更换新鲜细胞培养液。