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免疫(共)沉淀(IP/CoIP)试剂盒(磁珠法)
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    • 磁珠法两种洗脱方案的区别?
    • 两种洗脱方案均包含捕获抗体及目的抗原,低pH 洗脱样本中抗体为完整结构,变性洗脱样本中抗体解离为重链、轻链,请根据后续实验需求选择洗脱方案。
    • 如果我后续是想要跑native胶,不做变性电泳,如何选择样品缓冲液?
    • 用不含有SDS的WB上样缓冲液,但不经过变性,蛋白能否解离下来,我们无法确定,不能保证您后续的实验效果。
    • 如何减轻琼脂糖珠非特异性吸附?
    • 可以通过多次洗涤,和样品预处理(适当延长Protein A和Protein G的孵育时间)来降低背景,但应注意,选择此步骤后,试剂盒中protein A和protein G对应实验样本数减半。
    • 如果没有超声破碎仪的话,能不能用酶解的办法破碎细胞?
    • 酶解和超声都可以,酶按照实验室正常使用浓度配制即可。
    • 试剂盒中lysis buffer都要添加PMSF吗,怎么使用?
    • 该试剂盒中的PMSF都要额外准备,推荐abs9146,根据使用量,取每1mL lysis buffer加入10ul PMSF(100mM,溶解174mg的abs9146于足量的异丙醇中,定容到10mL,分装成小份贮存于-20℃。)使PMSF的最终浓度为1mM,混匀备用 (PMSF现用现加)。磁珠法缓冲液请按说明书配置后使用,buffer稀释均可用超纯水。

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