Protein G抗体纯化琼脂糖磁珠

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abs9905-10mL	4周	￥850.00	- +

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问如何解决磁珠易粘附管壁的现象？
答建议使用低吸附率的耗材进行磁珠操作。另外，在缓冲液中添加0.01%~0.1%（v/v）的非离子型去垢剂（如NP-40、Tween-20或Triton X-100）可以有效降低磁珠对耗材的粘附。

问如何提供高体洗脱效率？
答抗体与Protein A 配基亲和度太高导致抗体洗脱效率低，可以通过降低洗脱缓冲液的 pH值（1.9~2.5）、增大洗脱缓冲液的离子强度（可选用2~3 M MgCl2）或延长洗脱时间，提高抗体的洗脱效率。但应注意抗体在低 pH 条件下容易形成聚集物，抗体洗脱产物应马上用碱性缓冲剂（如Tris、HEPES等）调节pH至中性。

问如何提高磁珠在免疫沉淀反应中的特异性？
答抗体与样品进行孵育，形成抗体-抗原复合物，再用Protein A 磁珠捕获复合物。这种方法可以提高抗体与抗原的结合效率，并降低磁珠与样品接触的时间，从而提高沉淀产物的特异性。对于ChIP&CoIP也推荐使用此法。

答磁珠与抗体的结合效率与抗体的种属来源及所属亚型有关，请确认抗体的类型与Protein A 配基的亲和效率（如下表）。增加抗体与磁珠的孵育时间（30~120 min）、提高结合缓冲液的pH 值（8~9）及降低离子强度（25~100 mM NaCl）等方法可提高亲和效率。