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  • 彩色PAGE快速凝胶试剂盒(6%)
  • 货号: abs9365
    产品说明书
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    abs9365-1Kit 现货 ¥260.00
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    产品简介
    本产品采用上层胶和下层胶的预混配方,无需传统配胶方式中计算多组分加液量的过程,只需等体积混匀,并加入试剂盒中的改良型促凝剂即可凝胶,简便快捷。 所配的上层胶带有颜色(红色或绿色),加样孔清晰易辨,方便点样。 本产品配套提供的改良型促凝剂,具有更好的稳定性和催化效能,配胶过程中无需额外添加TEMED,避免难闻气味。同时促凝剂保存方便,只需4℃保存即可,开盖后可保持三月以上有效性。

    产品组分
    试剂盒组分名称规格
    彩色—上层胶缓冲液80 ml
    上层胶溶液80 ml
    下层胶缓冲液250 ml
    下层胶溶液250 ml
    改良型促凝剂10 ml
    以0.75mm凝胶为例,本试剂大约可制备125块胶。

    产品特点
    1. 彩色上层胶:可制备红色或绿色上层胶,加样孔清晰易辨,方便上样及区分不同凝胶。
    2. 配胶过程短:可快速配置一块或多块彩色PAGE凝胶,无需复杂计算及配置,只需将等体积凝胶溶液及缓冲液混合,并加入少许促凝剂即可,操作简便。
    3. 稳定且环保:促凝剂无TEMED成分,避免难闻臭味,并且更加稳定,4度即可稳定保存。凝胶均匀,弹性好,不易碎,电泳蛋白带型美观。
    4. 条带清晰:小分子蛋白条带更清晰。

    制胶流程(以一块 0.75/1.0/1.5 mm 的mini胶为例) 
    1. 取等体积 下层胶溶液 和 下层胶缓冲液,各 2.0/2.7/4.0 mL,混匀;
    2. 向步骤1的混合溶液中加入 40/60/80 μL的 改良型促凝剂,混匀;(注意,室温高于20℃时,改良型促凝剂添加量可减半,防止凝胶过快凝结)
    3. 将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5 cm即可(注意:此溶液为过量, 请勿全部注入, 可留少许于配胶杯中,以判断胶凝固状况),加入适量水或醇(如异丙醇、正丁醇等)覆盖于下层胶之上; 
    4. 待下层胶凝固后(约5~10 min),倒去上层水或醇并用滤纸条吸干残余水或醇;注意:当水(醇)和胶之间有一条折射线时, 说明胶已凝固。
    5. 取等体积 上层胶溶液 和 彩色上层胶缓冲液,各 0.5/0.75/1.0 mL,混匀;注意: 由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀
    6. 向步骤5的混合溶液中加入 10/15/20 μL 的 改良型促凝剂,混匀;
    7. 将步骤6的混合溶液注入制胶玻璃板中,插入梳齿;
    8. 待上层胶凝固后(约10~15 min),拔去梳齿即可用于电泳。 注意:请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液 

    保存条件
    本产品常温运输; 保存于 4℃(改良型促凝剂保存于-20℃),一年;(改良型促凝剂4℃保存可保存3个月)

    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
        提示: 尊敬的客户您好,如果您对我们的产品有什么疑问或想要了解的,可以点击“我要提问”按钮填写您的疑问。
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        我要提问
    • 电泳时,分子量较小的marker和条带分不开怎么办?
    • 这个问题的原因是分离胶浓度较低造成的,不同浓度的分离胶分离范围不同(见下图),选用较高浓度的分离胶有助于小分子量条带更加分散,便于观察。
    • 制胶过程中出现漏胶现象怎么办?
    • 出现漏胶,可能是两块玻板没有对齐,底部不在同一平面的原因,可以在水平桌面仔细对齐两块玻板,再夹紧。
    • 制胶时,室温半小时以上,胶仍未凝?
    • 1.可能是促凝剂每次配制用量较少,移液器可能未吸到,重新配制时,注意枪头是否吸到促凝剂,枪头插入液面下反复吹打 2-3 次

      2.也可能是室温较低,促凝剂量较少。室温<10℃时,按照说明书指导,促凝剂使用量不变或适量增加。
    • 配好下层分离胶或上层浓缩胶,还未加入玻璃板中就凝固了怎么办?
    • 1.促凝剂量过量,可以适当减少促凝剂量;
      2.室温较高,室温>10℃时,根据说明书指导促凝剂用量减半或酌情减少。
      3.一次配制多块凝胶,操作时间较久,一次性制备多块凝胶时,为防止快速凝胶可以适当减少促凝剂的用量或者分批配置
    • 分离胶与浓缩胶分界面不平,影响电泳效果怎么办?
    • 1.桌面不平,用水平仪平衡桌面,下层分离胶注入玻板后,缓慢左右平拉制胶架 2-3 下。
      2.由于本产品凝胶速度较快,使用移液器缓慢加入可能会导致分离胶和浓缩胶分界面不平,最好在按照操作说明配制好分离胶和浓缩胶后立即先后将分离胶和浓缩胶灌入凝胶模具中,避免加入过程太过缓慢。
      3.液封时,太暴力冲击到分离胶,导致分离胶和浓缩胶界面不平,用洗液瓶紧贴长玻板缓慢水平加入液封剂,避免对下层分离胶有冲击。
    • 拔梳子后,上层浓缩胶梳齿处不是规则状怎么办?
    • 可能是因为凝胶不充分,就拔梳子了。在制胶杯中留少许剩余胶溶液,以判断凝胶状态, 确定拔梳子时间。
    • 拔梳子后,胶孔变形怎么办?
    • 胶孔变形可能是因为浓缩胶与梳子吸附较紧或上层胶凝固时间过长,胶干了。浓缩胶凝好后,即可拔掉梳子,(切勿等待胶干了在拔掉梳子)缓慢平移梳子, 吸力较大可在电泳液中浸湿润滑后,再拔梳子,不建议强行拔。
    • 电泳时,样本渗漏怎么办?
    • 1.拔梳子时较暴力,导致分离胶和浓缩胶分离,之间有间隙。拔梳子时,缓慢平移,新手建议在电泳液浸泡中拔除梳子。

      2.加样时,枪头插入胶孔过深,导致胶碎裂。加样应接近胶孔底部,且避免对胶有损伤。

    • 电泳过程中,观察marker 分布与对应胶浓度蛋白分离效果有较大差异如何处理?

    • 可能是配制下层分离胶时未按照说明书等体积配制。需按照说明书准确操作。

    • 电泳时,样本压缩效果不明显怎么办?

    • 可能是分离胶灌注较满,浓缩胶空间较少的原因,下层分离胶加至约距短玻璃板顶端 1.5cm或距梳齿约 0.5cm  即可。
    • 转膜时,胶不易剥离下来怎么办?
    • 玻板未清洗干净,表面有小颗粒物质或灰尘,导致剥胶困难。洗净玻板及其他附件,每次用之前,用 75%酒精擦拭玻璃和胶条,有利于剥胶且防漏。

    • 条带出现“微笑”现象,中间凹两边翘起如何处理?
    • 1.凝胶时间较短。延长凝胶时间或适当增加促凝剂用量,使其凝胶充分凝固后电泳。
      2.部分凝固不均匀导致。加入促凝剂后,胶溶液没有充分混匀。
    • 条带出现“皱眉”现象,中间鼓坡两边向下如何处理?

    • 两玻板之间底部有气泡导致。胶溶液摇匀、注入玻板时,尽量避免气泡的产生。

    • 条带出现拖尾现象怎么办?
    • 1.样本溶解效果不佳。上样前离心,选择适当的样本缓冲液,加适量的样品促溶剂。
      2.分离胶浓度过大。降低凝胶浓度。
      3.电泳缓冲液放置时间过长。使用新配置的电泳缓冲液。

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