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  • 即用型基质胶

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      • 类器官传代时,基质胶和细胞团分不开咋办?
      • 首先可以采取一些有效的措施促进两者分离:

        1)加入适量(10-14mL)缓冲液,稀释基质胶类器官混合物,能促进分离;

        2)将基质胶类器官混合物放于-20℃,5min,加速基质胶液化,能促进分离;或者4℃静置40min促进基质胶液化;

        3)离心机的选择非常重要,水平角离心机相比固定角离心机更利于基质胶和类器官分离;

        4)离心机的温度最好是4℃(可避免基质胶固化),离心转速可适当提高(最高不要超过500g),离心时间可适当加长(最常不超过10min)。

      • 培养类器官时,怎样避免基质胶很快凝固?
      • 采用金属冰盒,效果更好,点胶前,将冰盒,枪头,离心管,EP管放-20℃预冷1h以上,也就是和基质胶接触的东西(除孔板外)都进行充分预冷,可以有效避免基质胶凝固。
      • 基质胶融化完或使用时发现有气泡咋办?
      • 基质胶本身富含多种蛋白,粘滞性大,出现“吐气泡”现象的原因主要是流动性变差。如果出现气泡,使用时可以用桌面离心机2000r离1min,可有效去除小气泡。
      • 当基质胶不小心凝固后,当天是不愿意再“干活”嘞
      • 基质胶凝固以后,采用冰水化合物降温,采用4℃静置2h,采用-20℃静置10min,都无法“换醒”基质胶。正确做法是先放-20℃,让它进入“冬眠”2h,然后放在4℃过夜融化,等第二天它就“流动”起来了。
      • 基质胶放在冰盒上融化,冰盒是放在超净台上的,过了半小时发现基质胶凝了?
      • 融化时间非常短,对高温过度“敏感”。基质胶如果不是全部插在冰里,一半暴露在空气中,其融化时间很短,通常在冰上不超过30min就完全液化了,尤其是在炎热的夏天,暴露在空气中的一半很快会因为温度过高而凝固掉,所以基质胶最好的融化方法是在4℃冰箱过夜融化。
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