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  • 磁珠法PCR产物回收试剂盒

    • MagBeads PCR Product Extraction Kit
    货号: abs60151
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    产品说明书
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    产品描述
    描述
    产品简介:

        本试剂盒提供了一种快速、简便、高效的PCR产物回收方法。可以直接从各种PCR产物以及含有DNA核酸的溶液中回收100bp及以上的DNA片段,回收率高达85%以上,同时有效去除引物二聚体、dNTP、无机盐及蛋白质等杂质,操作快速简单:20分钟即可完成整个操作流程,无需离心。

        本试剂盒经结合液结合、磁珠吸附DNA片段、漂洗以及洗脱等步骤后,可得到纯度优良的核酸产物,所得产物可直接用于测序、酶切、PCR等下游分子生物学实验,回收的PCR产物纯度高,A260/280=1.7~1.9,A260/230=1.9~2.3。 

        本试剂盒可手动法配合EP管进行少量样本操作;手动法配合96孔圆孔板和专用96位磁板架实现高通量操作,单人可同时操作1~6块96孔板,同步进行96~576份PCR产物样本回收工作;亦可配合自动化核酸提取仪实现自动化工作。 

    试剂盒组分:
    Kit  Component
    试剂盒组成
    abs60151-50T (50T)abs60151-100T (100T)abs60151-500T (500T)
    Magnetic Beads
    磁珠悬浮液
    2.5mL5ml25ml
    Binding Buffer
    结合液
    6ml12ml60ml
    Wash Buffer
    清洗液
    2ml
    (需加入8ml乙醇)
    4ml
    (需加入16ml乙醇)
    20ml
    (需加入80ml乙醇)
    Elution Buffer
    洗脱液
    4ml8ml40ml


    注意事项 

    (1)操作之前,请务必认真阅读本产品说明书。 

    (2)磁珠悬液在保存过程中应避免冷冻、离心等操作。 

    (3)建议使用质量好的移液器吸头和反应管,避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。 

    (4)磁珠易沉淀入瓶底,使用前应摇匀,使磁珠充分悬浮。  

    (5)试剂含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。 

    (6)磁珠洗脱前应彻底去除洗涤液,避免残留乙醇影响DNA洗脱效率。 

    (7)请勿长时间干燥磁珠,以免引起不可逆的磁珠聚集。 

    (8)DNA分子呈酸性,建议在Eluent洗脱液中保存。 

    (9)本产品仅供研究使用。
    使用方法
    1. 准备

    真空干燥箱稳定到55℃;涡旋混合仪的振动频率设定为1000rpm。

    2. 处理磁珠

    向EP管中加入50μL磁珠悬浮液(提前摇晃均匀),将装有磁珠的EP管置于磁力架上静置约15s至磁珠完全吸附,弃去磁珠保存液。
    1倍Magnetic Beads可以去除~100bp片段,建议处理引物二聚体比较严重的样品。
    2倍可以回收100bp的片段。若回收更小片段 DNA,加入3~5倍Magnetic Beads。

    3. 加入样品

    向EP管中加入待纯化的PCR样品,涡旋混匀5min。

    4. 加入结合液

    向装有磁珠的EP管中加入结合液。当样本体积小于34μL时,加入100μL结合液;当样本体积大于34μL时,加入3倍体积结合液。


    5. 磁性分离

    将EP管置于磁力架上静置约15s至磁珠吸附完全。如EP管内盖有磁珠残液,保持EP管于磁力架上,整体颠倒两次使磁珠吸附完全,然后彻底吸弃上清液,期间避免接触磁珠。

    6. 清洗

    向EP管中加入500μL清洗液(使用前需按标签提示加入对应体积乙醇),涡旋震荡1min,然后参考步骤5进行磁性分离,弃尽上清液。(该步骤操作2次)

    7. 除醇

    保持EP管于磁力架上,置于55℃烘箱中干燥8min

    8. 洗脱

    取出EP管,加入50μL洗脱液(根据自己所需目的核酸浓度决定用量,洗脱液提前60℃水浴中预热可以提高洗脱效率),用移液器吹打3min(或涡旋振荡3min)使磁珠与洗脱液充分混匀。  

    9. 核酸转移

    将EP管置于磁力架上静置15s至磁珠吸附完全,用移液器将洗脱液转移至另一干净EP管中得DNA回收产物,此时可弃去磁珠。

    储存/保存方法
    试剂盒内的Magnetic Beads置于2-8℃保存,其余试剂室温保存
    基本信息
    别名
    MagBeads PCR Product Extraction Kit
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
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