即用型免疫组化二抗试剂盒（抗兔）

 未提供但必需试剂：一抗（来源于兔）、5% 山羊血清（abs933）、PBST

本试剂盒是基于聚合物技术的最新一代免疫组化二抗非生物素检测系统，信号更强、操作更加简单。 与传统的免疫组化二抗试剂盒相比，具有3个特点：一是由于聚合物的独到之处，使得酶分子与二抗IgG分子直接结合形成的多聚物分子高度敏感性，有效减少了一抗使用量，一抗试剂可再稀释2-4倍；二是由于避免了生物素的使用，从而可以避免由于生物素引起的非特异性背景显色，得到更清晰的显色和更干净的背景；三是快速，更短的试剂孵育时间。

储存及有效期

2-8°C保存。每个组分至少可以保存12个月。

操作步骤：

说明：所有的步骤在室温下操作，加试剂可以直接滴瓶滴定，也可以用移液器，一滴=30-40ul

1. 脱蜡、水化组织切片

2. PBST洗2-3次各5分钟

3. 根据所应用的一抗的特殊要求，对组织切片进行预处理（抗原修复）

4. PBST洗2-3次各5分钟

5. 加入100ul 内源性过氧化物酶封闭剂 孵育10分钟，阻断内源性过氧化物酶，以减少非特异性背景染色

6. PBST洗2-3次各5分钟

7. 加入100ul 5％至10％正常山羊血清室温孵育封闭20分钟，如一抗使用含有5%至10%正常山羊血清的缓冲液中稀释，则此步骤可以省略

8. PBST洗2-3次各5分钟

9. 加一抗，室温或37℃孵育30分钟

10. PBST洗2-3次各5分钟

11. 加入100ul HRP酶标抗小鼠&兔二抗聚合物 孵育30分钟  注意：此液对光敏感，注意避光

12. PBST洗2-3次各5分钟

13. 使用新鲜配制的DAB显色液（用DAB稀释液稀释DAB底物得到，现配现用），室温孵育5分钟（时间可根据显色情况适当调节），自来水冲洗玻片

14. 加入100ul苏木素, 孵育3分钟（时间可根据显色情况适当调节），自来水冲洗返蓝

15. 脱水，透明，封片