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  • 广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒

    货号: abs60010
    产品说明书
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    abs60010-100T 1-2周 ¥945.00
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    产品描述
    描述
    该试剂盒采用磁珠法和新型独特的溶液系统,适合于从植物样品中快速简单地提取基因组DNA。可快速完成一个或多个100mg新鲜或20mg干燥的植物样品DNA的纯化工作。磁珠在高盐、低pH值状态下选择性地结合DNA,再通过漂洗液将杂质和其它成分去除,最后用低盐、高pH值的洗脱缓冲液将DNA从磁珠上洗脱,纯化后的DNA可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。
    产品特点:
    1、简单快速、无毒无害。
    2、多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
    自备试剂:无水乙醇
    产品信息:
    组成保存100次
    RNaseA(10mg/ml)-20℃300μl×2
    缓冲液 AP1室温50ml
    缓冲液 AP2室温20ml
    缓冲液 AP3/E室温25ml(第一次使用前加入 50ml 无水乙醇)
    漂洗液 WB室温25ml(第一次使用前加入 100ml )
    洗脱缓冲液 EB室温10ml×2
    吸附柱 AC室温100个
    收集管(2ml)室温100个
    使用方法
    提示:
    1、第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及 时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
    2、第一次使用前请先在缓冲液 AP3/E 中加入指定量无水乙醇!
    操作:
    1、取适量植物组织(新鲜组织 100mg 或干重组织 20mg)在研钵中加入液氮充分碾磨 成细粉。
    2、转移细粉到一个 1.5ml 离心管,不要解冻,加入 400μl 缓冲液 AP1 和 4μl RNase A(10 mg/ml),旋涡振荡,充分混匀帮助裂解。
    3、65℃水浴 10min,在水浴过程中颠倒离心管 2-3 次,混合样品。
    4、加入 130μl 缓冲液 AP2,充分混匀,冰上放置 5 min,12,000rpm 离心 5-10 min,小 心吸取上清到一个新的 1.5ml 离心管。
    5、计算上清量,加入 1.5 倍体积的 AP3/E(请先检查是否已加入无水乙醇!),立即吹打 混匀。
    6、将上一步所得混合物(包括可能出现的沉淀)加入一个吸附柱 AC 中,(吸附柱放入 收集管中)12,000rpm 离心 30-60 sec,倒掉废液,吸附柱 AC 放入收集管中。
    7、加入 500μl 漂洗液 WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心 30 sec, 弃掉废液。
    8、重复操作步骤 7。
    9、将吸附柱 AC 放回空收集管中,12,000rpm 离心 2 min,将吸附柱置于室温放置数分 钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
    10、取出吸附柱 AC,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加 50-100μl 洗脱 缓冲液 EB(洗脱缓冲液可事先在 65℃水浴中预热), 室温放置 2-5 min,12,000rpm 离心 1 min。为了增加基因组 DNA 的得率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室 温放置 2 min,12,000rpm 离心 1 min。
    注意:DNA 产物应保存在-20℃, 以防 DNA 降解。
    储存/保存方法
    室温保存,有效期12个月。
    注意事项
    1、裂解液 AP1、AP3/E 低温时可能出现析出和沉淀,可以在 37℃水浴几分钟帮助重新 溶解(AP3 加入乙醇前可加热,加入乙醇后不可加热),恢复澄清透明后冷却到室温 即可使用。
    2、避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化。
    3、缓冲液 AP3/E 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和 衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
    4、洗脱液 EB 不含有螯合剂 EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗 脱, 但应该确保 pH 大于 7.5, pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱 DNA 应该保存在 -20℃。DNA 如果需要长期保存,可以用 TE 缓冲液洗脱 (10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH 8.0),但是 EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
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