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  • 石蜡组织基因组DNA快速提取试剂盒

    货号: abs60019
    产品说明书
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    abs60019-50T 1-2周 ¥473.00
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    产品描述
    描述
    本试剂盒采用独特的脱蜡方法,不含二甲苯,无刺激性气味,对人体无毒无害。独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
    产品特点:
    1、脱蜡过程无毒无害,操作安全。
    2、重复性好:离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
    3、多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
    自备试剂:无水乙醇。
    产品信息:
    组分保存50次
    SLⅠ室温125ml×2
    SLⅡ室温60ml
    裂解液 TL室温11ml
    结合液 CB室温11ml
    抑制物去除液 IR室温25ml
    漂洗液 WB室温15ml(第一次使用前加入 60ml 无水乙醇)
    洗脱缓冲液 EB室温15ml
    蛋白酶K(20mg/ml)室温1ml
    吸附柱 AC室温50个
    收集管(2ml)室温50个
    使用方法
    提示:
    第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入 后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
    脱蜡方法一:
    1、将组织切片 4-5 片,装入到 2ml EP 管中,加入 1.5mlSLI 液,充分振荡。 2、65℃水浴 30 min,再次充分混匀,12000rpm,4℃离心 15 min。
    3、弃上清,再加入 1mlSLI 液,按以上步骤重复 2-3 次。
    4、沉淀(组织)加入 200ul 裂解液 TL 和 1mlSLⅡ溶液,加入 20-50ul 蛋白酶 K,56℃ 水浴过夜。
    5、观察组织消化情况,如还有组织未完全消化,加入 10-20ul 蛋白酶 K,56℃水浴 10-20 min 或直至组织消化完全(期间可用涡旋充分振荡混匀加速组织消化)。
    脱蜡方法二:
    组织切片(10μm)2~4 张,装入 1.5ml 的灭菌 Ep 管中,加入 1 ml 二甲苯,充分 混匀 1 0 sec,全速离心 2 min,弃上清。加入 1 ml 无水乙醇,充分混匀,离心 12,000rpm 2 min,弃上清。打开 Ep 管,室温(15~25℃)下或 37℃孵育 10 min,直到残余的乙醇 全部挥发。(方法二中所需试剂本试剂盒不提供)
    1、加入 200μl 结合液 CB,立刻涡旋振荡充分混匀,在 70℃放置 10 min。
    2、冷却后加入 200μl 无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。
    3、将上一步混合物(包括可能有的沉淀)加入一个吸附柱 AC 中,(吸附柱放入收集管 中)12,000rpm 离心 1 min,倒掉收集管中的废液。
    4、加入 500μl 抑制物去除液 IR,12,000rpm 离心 30 sec,弃废液。
    5、加入 500μl 漂洗液 WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心 30 sec, 弃掉废液。
    6、重复操作步骤 5。
    7、将吸附柱 AC 放回空收集管中,12,000rpm 离心 2 min,将吸附柱置于室温放置数分 钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
    8、取出吸附柱 AC,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加 30-100μl 洗脱缓 冲液EB(洗脱缓冲液事先在65℃水浴中预热效果更好),室温放置3-5 min,12,000rpm 离心 1 min。为了增加 DNA 的回收率,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,室温 放置 2 min,12,000rpm 离心 1 min。
    (注意:DNA 产物应保存在-20℃,以防 DNA 降解)
    储存/保存方法
    室温保存,有效期12个月。
    注意事项
    1、结合液 CB 或者抑制物去除液 IR 低温时可能出现析出和沉淀,可以在 37℃水浴几分 钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
    2、避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化。
    3、结合液 CB 和抑制物去除液 IR 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾 染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
    4、洗脱液 EB 不含有螯合剂 EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保批 pH 大于 7.5,pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱 DNA 应该保存在-20℃。 DNA 如果需要长期保存,可以用 TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是 EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
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