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  • 无外泌体胎牛血清

    • Exosome depleted Fetal Bovine Serum,去外泌体血清,Exosome-Free FBS
    货号: abs993
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    abs993-50ml 现货 ¥2726.00
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    产品描述
    描述

    对于大多数细胞来说,体外培养时所用的标准培养基都必须在基础培养基的基础上外加FBS作为生长添加物。常用的FBS通常来至牛血清,其中含有大量的牛外泌体。这些外泌体含牛的相关蛋白质或miRNA等分子,当研究相关细胞自身分泌外泌体时,牛血清中的外泌体可能会造成严重的背景问题,从而影响或干扰结果的判断。本品专为外泌体研究而设计,由无菌采集健康胎牛血清过滤而成,去除97%以上的胎牛血清内源外泌体。具有无支原体,无内毒素等特点。

    应用
    适用外泌体研究
    使用方法

    1、血清解冻:将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20°C进入 37°C解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2~8°C区域中使之融化,然后再室温下使之全融。使用前在预温到将使用的温度(如 37°C),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻的摇晃均匀。

    血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物(镜检形状类似小黑点),主要是血清中脂蛋白的变形或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出 ,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。

    若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器中,再放回冷冻。

    去除方法:可使用 0.45um 过滤器将完全培养基(血清、培养基、双抗等物质配置完成)过滤即可。

     2、避免析出物和澄明度降低:建议在使用血清的时候,注意正确的血清解冻步骤,并尽量避免长时间的将血清至于非冻结状

    储存/保存方法
    -20℃,有效期1年。
    产品用途
    该产品仅供科研使用。
    注意事项
    本品在冻存之后高丰度蛋白会形成结晶,在NTA检测时会有杂峰出现,此属正常现象。
    基本信息
    别名
    去外泌体血清,Exosome-Free FBS
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
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      • 请问是通过什么手段去除血清中的外泌体呢?
      • 我们是通过超速离心法去除绝大部分血清中的外泌体,适用于外泌体相关细胞实验研究。
      • 如何解冻血清才不会使产品质量受损?
      • 将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
      • 如何避免产生沉淀物
      • 1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃,实验显示非常容易产生沉淀物。

        2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生

        3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。

        4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。

        5、若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。

      • 何谓热灭活
      • 一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
      • 有必要做热灭活吗?
      • 实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
      • 血清溶解后有不溶物,是什么原因?会对实验有影响吗?
      • 血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
      • 保存有什么需要注意的?

      • (1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或包装瓶冻裂.

        (2)热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.

        (3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法: -20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.

        (4)提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.

        (5)血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下""小黑点"":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象""小黑点"",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.

        (6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量"

      • 如何保存?

      • 血清应保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

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