产品描述 | |
描述 | 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。 EDTA抗原修复液(50×)(EDTA Antigen Retrieval Solution (50×))采用了广泛使用的EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 |
应用 | 特别适用于石蜡切片,也可用于冰冻切片等其它样品。 |
使用方法 | 1、石蜡切片:
(1)脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡 2×5min。无水乙醇 2×5min。90%乙醇 2×5min,70%乙醇 5min。蒸馏水 2×5min。 (2)抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 10~20min(最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用水浴锅或微波炉。如果使用微波炉加热,需注意避免修复液暴沸。随后大约在 20~30min 冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1~2 次,每次 3-5min。即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 2、冰冻切片:用免疫染色洗涤液洗涤切片 5min。抗原修复的过程如石蜡切片的抗原修复过程。 3、其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片的步骤进行。 |
储存/保存方法 | 2~8℃保存。如果长时间不使用,请保存于-20℃。有效期12个月。 |
注意事项 | 1、为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,戴手套等。 2、EDTA 抗原修复液(50×)使用前必须用重蒸水或 MilliQ 水稀释 50 倍,配制成抗原修复液(1×)。 |
基本信息 | |
PH值 | 8.0 |
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究 |
- 实验方法 实验条件
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- 非小细胞肺癌肿瘤部分免疫微环境的评估以及与患者临床病理因素和预后的相关性研究
邱煜淞
中国医科大学. 2021 Mar 01 .
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