双链DNA酶

        dsDNase 是一种核酸内切酶，能够裂解 DNA 中的磷酸二酯键，生成带有 5'- 磷酸和 3'- 羟基末端的寡核苷酸。dsDNase 能够特异性的消化双链 DNA（double-stranded DNA, dsDNA）而不会消化单链
DNA、引物、探针和 RNA。dsDNase 具有热敏感性，可在 55℃条件下快速失活。dsDNase 主要用于反转录实验前快速去除 RNA 样本中的基因组 DNA 污染，与传统的使用 DNase I 去除基因组 DNA 污染
的方法相比，无需额外加入 EDTA 失活，可减少对 RNA 的损伤，同时节省实验时间，保证 RNA 水平定量的准确性。
产品组成 

组分	规格
dsDNase(1 rxn/μl)	50 μl
10× dsDNase Buffer	200 μl

活性定义
根据 Kunitz 实验方法，在 25℃ pH 5.0 的条件下，以过量的大分子 DNA 为底物，在 260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加 0.001 的酶量定义为 1 个活性单位（U）。
储存缓冲液
25 mM Tris-HCl (pH7.5，@25℃ ), 2.0 mM MgCl_2, 10 mM NaCl,0.01 % (v/v) Triton X-100, 50 % (v/v) glycerol。
抑制与失活
抑制条件：金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制 dsDNase 的活性；
失活条件：55℃温育 5 min。
质量控制
蛋白质纯度
通过 SDS-PAGE 并考马斯亮蓝染色，该酶纯度 ≥90%。
RNA 酶活性检测
将酶液与 RNA 底物 在 37 温育 1 h，通过凝胶电泳检测没有发现RNA 底物降解。
功能检测
该产品被用于测试去除来自 RNA 样本中的基因组 DNA 并进行了RT-qPCR 扩增，发现去除率 ≥99.9%。RNA 数量不受 dsDNase 处理的影响。

使用方法
1、于冰上配制如下反应体系： 

试剂	使用量
dsDNase	1 μl
10× dsDNase Buffer	1 μl
模板 RNA	X μl
总 RNA	1 pg~5 μg/10 μl
mRNA	0.1 pg~500 ng/10 μl
特异性 RNA	0.01 ng~500 ng/10 μl
Nuclease-Free Water	To 10 μl

2、轻轻吹打混匀反应体系后，将以上混合液在 37℃温育 2~5 min；
3、65℃热失活 2 min，迅速将获得的 RNA 置于冰上，用于后续实验。长期保存请置于 -80℃，避免反复冻融。

-20 ℃保存，有效期24个月。

1、若 RNA 样本下游用于 RT-PCR，且目的基因长度 ≥3 kb，失活步骤前需添加终浓度为 10 mM 的 DTT；
2、为避免 RNA 降解，可在反应体系中加入适量的 RNase Inhibitor。