产品描述 | |||||||||||||||||
描述 | dsDNase 是一种核酸内切酶,能够裂解 DNA 中的磷酸二酯键,生成带有 5'- 磷酸和 3'- 羟基末端的寡核苷酸。dsDNase 能够特异性的消化双链 DNA(double-stranded DNA, dsDNA)而不会消化单链 DNA、引物、探针和 RNA。dsDNase 具有热敏感性,可在 55℃条件下快速失活。dsDNase 主要用于反转录实验前快速去除 RNA 样本中的基因组 DNA 污染,与传统的使用 DNase I 去除基因组 DNA 污染 的方法相比,无需额外加入 EDTA 失活,可减少对 RNA 的损伤,同时节省实验时间,保证 RNA 水平定量的准确性。 产品组成
活性定义 根据 Kunitz 实验方法,在 25℃ pH 5.0 的条件下,以过量的大分子 DNA 为底物,在 260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加 0.001 的酶量定义为 1 个活性单位(U)。 储存缓冲液 25 mM Tris-HCl (pH7.5,@25℃ ), 2.0 mM MgCl2, 10 mM NaCl,0.01 % (v/v) Triton X-100, 50 % (v/v) glycerol。 抑制与失活 抑制条件:金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制 dsDNase 的活性; 失活条件:55℃温育 5 min。 质量控制 蛋白质纯度 通过 SDS-PAGE 并考马斯亮蓝染色,该酶纯度 ≥90%。 RNA 酶活性检测 将酶液与 RNA 底物 在 37 温育 1 h,通过凝胶电泳检测没有发现RNA 底物降解。 功能检测 该产品被用于测试去除来自 RNA 样本中的基因组 DNA 并进行了RT-qPCR 扩增,发现去除率 ≥99.9%。RNA 数量不受 dsDNase 处理的影响。 | ||||||||||||||||
使用方法 | 使用方法 1、于冰上配制如下反应体系:
3、65℃热失活 2 min,迅速将获得的 RNA 置于冰上,用于后续实验。长期保存请置于 -80℃,避免反复冻融。 | ||||||||||||||||
储存/保存方法 | -20 ℃保存,有效期24个月。 | ||||||||||||||||
注意事项 | 1、若 RNA 样本下游用于 RT-PCR,且目的基因长度 ≥3 kb,失活步骤前需添加终浓度为 10 mM 的 DTT; 2、为避免 RNA 降解,可在反应体系中加入适量的 RNase Inhibitor。 | ||||||||||||||||
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究 |
- 实验方法 实验条件
共 0 张,还能上传 8 张 提交
- 提示: 尊敬的客户您好,如果您对我们的产品有什么疑问或想要了解的,可以点击“我要咨询”按钮填写您的疑问。
提交不成功?请联系info@absin.cn。
促销资讯 更多
订购信息
您可以从我们的授权经销商处购买absin产品或获得技术支持。若要查看您所在地区的经销商,请从以下的下拉列表中选择。