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  • Endless Fluc mRNA

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      • 工具mRNA推荐的帽结构是哪一种?
      • Cap1 AG。加帽率达到了95%。
      • 工具mRNA的纯度能达到多少?
      • 线性mRNA可达到90%的纯度;环状mRNA如果长度是3-5k,可达到科研级别纯度,通常能达到85%的纯度。环状mRNA序列越长,关环效率越低,纯化难度越高。

      • 工具mRNA是什么状态的?
      • 我司的工具mRNA是液体状态,通用溶剂一般是1mM柠檬酸钠盐溶液,pH为6.4。

      • 工具mRNA保存条件是什么?

      • 需要低于-40°C保存,-80℃冰箱或液氮保存都可以,爱必信所提供的均为新鲜生产的产品,为了达到最佳使用效果,请在收到货物的2个月内使用。若不小心将mRNA短期(例如1天)存放于-20℃,可以在正式实验之前将mRNA跑琼脂糖凝胶电泳看其是否降解。
      • 五种核苷酸修饰有什么区别呢?
      • 不同核苷酸修饰表现出不同的功能和作用,其中假尿苷修饰和甲基假尿苷修饰是应用最为广泛的,具体选择哪一种修饰应当根据实验确定。

        核苷酸修饰 作用
        Pseudo-UTP (Ψ)
        假尿苷
        改变密码子、增强转录本稳定性和应激反应应答。降低mRNA的免疫原性,提高mRNA的稳定性并增强其翻译能力
        N1-Methylpseudo-UTP (mΨ)
        甲基假尿苷
        通过增加核糖体密度以 eIF2α 依赖性和独立机制增强翻译,比假尿苷修饰更能降低mRNA的免疫原性,并可增强mRNA的蛋白表达能力
        N6-Methyl-ATP(m6A) 与mRNA 的稳定性、剪接加工以及microRNA 的加工有关,可促进mRNA的翻译
        5-Methyl-CTP (5mC)  5mC修饰连同多种效应酶,执行多种功能;5mC的分布因细胞类型而异,在mRNA的特定位置上的5mC修饰表现出不同的调控活性:它们可以促进或抑制翻译
        5-Methoxy-UTP(5moU) 可以降低所得mRNA 的免疫原性,促进蛋白表达,对炎性巨噬细胞反应的诱导可忽略不计

        https://mp.weixin.qq.com/s/BrmtZ6KybaMcWckHlX-F0w
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