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  • 染色质免疫共沉淀(ChIP)试剂盒

    • ChIP试剂盒,染色质免疫共沉淀试剂盒,超声法ChIP试剂盒,超声法染色质免疫共沉淀试剂盒,ChIP Kit,ChIP Kit
    货号: abs50034
    产品说明书
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    abs50034-22T 现货 ¥4000.00
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    产品描述
    描述
    试剂盒组分:

    序号

    名称

    包装量

    保存温度

    1

    蛋白 A/G 磁珠

    450ul

     

     

     

     

     

    2-8℃

     

     

     

     

     

    2

    ChIP 稀释缓冲液

    12.5ml

    3

    低盐洗涤缓冲液

    12.5ml

    4

    高盐洗涤缓冲液

    12.5ml

    5

    Licl 洗涤缓冲液(A+B)

    13(6.5+6.5)ml

    6

    TE 缓冲液

    12.5ml

    7

    细胞裂解缓冲液

    5ml

    8

    细胞核裂解缓冲液

    5ml

    9

    ChIP 洗脱缓冲液(W/O 蛋白酶 K)

    5ml

    10

    10 x 甘氨酸

    25ml

    11

    10 x PBS

    60ml

    12

    离心过滤器 (Gel Recovery Column)

    24个






        RT

     

     

     

     

     

     

    13

    2.0 ml接收管 (2.0 ml Collection Tube)

    24个

    14

    1.5 ml接收管 (1.5 ml Collection Tube)

    24个

    15

    激活buffer (Buffer CBS)

    7ml

    16

    结合缓冲液 (Binding Solution)

    12ml

    17

    WA Solution

    12.5ml

    18

    Wash Solution

    6ml

    19

    Elution Buffer

    5ml

    20

    ddH2O

    5ml

    21

    蛋白酶抑制剂混合物,100x DMSO 储液

    350µl

     

     

     

    -20 ℃

     

    22

    蛋白酶 K(20mg/ml)

    60ul

    23

    核糖核酸酶 A(10mg/ml)

    60ul

    24

    RNA 聚合酶 II 抗体,克隆号 CTD4H8

    25ug

    25

    Normal Mouse IgG

    25ug

    26

    对照引物

    75ul

    应用
    应用于超声法染色质免疫共沉淀(ChIP)实验
    使用方法
    实验详细步骤请参考说明书操作。
    储存/保存方法
    请按照试剂盒中各组分保存条件分别于室温、2-8℃及-20℃保存。
    基本信息
    别名
    ChIP试剂盒,染色质免疫共沉淀试剂盒,超声法ChIP试剂盒,超声法染色质免疫共沉淀试剂盒,ChIP Kit
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
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      • 如何预测靶基因结合区域或设计引物?
      • 参考文献中已报道的靶基因结合序列,或使用在线软件(如ECR Browser或MEME等)分析目的基因启动子序列。

      • 我的实验要设置多少组对照组?
      • 建议设置阴性对照组、阳性对照组、实验组、input组、无抗体对照组。

      • CHIP实验目的蛋白怎么选择?没有CHIP级别的抗体怎么办?
      • 建议优先选择CHIP/CHIP-Seq验证后的抗体,提高实验的成功率。优宁维提供多种CHIP/CHIP-Seq验证货号。不建议使用WB验证抗体开展CHIP实验,可以尝试IHC/IF验证抗体,但没有售后保障。

      • 磁珠法和琼脂糖珠法有什么区别?哪种适用于测序?
      • 磁珠法搭配磁力架使用,有更方便高效的洗涤效率,更好的富集度和更低本底信号,且磁珠法可以避免来自封闭用DNA的本底信号,适用后续ChIP-Seq实验。

      • 超声法和酶解法有什么不同?
      • 酶处理温和,不易变性,损伤小,片段为1-3个核小体,处理更均一,方法相对简单。酶解法有一定的局限性:对于转录因子来说,因为DNA结合区域覆盖多个核小体,酶切法会将结合区打碎;酶切的位点主要在核小体之间,不适合位点位于核小体间DNA linker处(P53);酶切条件37°C可能会导致蛋白表位的降解。超声法快速有效,更适用于转录因子,但超声条件需要摸索。

      • abs50034试剂盒里对照分别是什么?
      • 本试剂盒配的阳性对照抗体为RNA 聚合酶 II 抗体,对照引物为人的GAPDH引物序列。如果样本为小鼠,需要自行合成小鼠GAPDH对照引物。本试剂盒阴性对照抗体为Normal Mouse IgG,阴性对照抗体要根据您目标蛋白一抗的种属来源选择,推荐阴性对照抗体和目的蛋白抗体选择同一种属来源。

      • 超声处理结果好坏评判标准是什么?
      • 超声后的染色质片段大多在200-1000bp范围内的弥散条带是比较好的超声结果。

      • CHIP实验对超声仪和超声条件有没有什么要求?
      • 探头式、震荡式和水浴式超声仪均适用于CHIP实验超声处理,但是不同的仪器、细胞类型和细胞密度,超声的条件和超声结果差别较大。实验前需要进行超声功率和时间的优化。超声功率建议做几个梯度,比如10%-60%,或100W-400W。超声时间也需要做几个梯度,比如1min-5min,这个是指超声总时长,不包括间隔时间。注意超声要在冰上进行,且要设计时断时续的超声程序,保证低温;探头式超声仪的探头要尽量深入管中,但不接触管底或侧壁,以免产生泡沫;总超声时间也不要太长,以免蛋白降解。

      • 我该如何对细胞进行计数?
      • 建议在平时培养细胞(非实验)时,细胞长到80-90%密度时对细胞进行计数,实验时可根据细胞密度大致判断细胞数量。

      • abs50034这个CHIP试剂盒适用于什么样本?
      • 推荐用细胞样本。如果做组织,需要自行摸索。

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