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  • 全能核酸酶

    • MultiNuclease;MultiNuclease
    货号: abs60157
    分子量: 26KD
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    产品描述
    描述

            MultiNuclease全能核酸酶,又称广谱核酸酶,是一种来源于Serratia Marcescens的非限制性核酸内切酶。它能够在非常广泛的条件下(6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解所有形式的(双链、单链、线状、环状或超螺旋形式)DNA和RNA,生成含有5’-磷酸末端的3-5个寡核苷酸残基片段,广泛用于去除生物制品中的核酸。
            本品经基因工程改造在 Escherichia coli (E. coli)中表达纯化,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别从而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
            该酶与 BacReady-Protein Extraction Solution 和 RIPA LysisBuffer 等蛋白抽提试剂配合使用,从而消除粗提物中的核酸,降低粘度。

    来源
    E. Coli(BL21)
    应用
    蛋白提取时去除核酸污染;2D 凝胶电泳; Western Blot ;IP- Western
    纯度
    ≥95%
    活性
    酶活:≥250U/ul
    在过量底物条件下,37℃反应时间30分钟,使260 nm处的吸光度变化为1.0定义为一个酶活。
    浓度
    推荐使用条件:
    条件参数最佳条件有效条件
    Mg2+1-2mM1-10mM
    pH8.06-10
    温度37℃0-42℃
    DTT0-100mM>0mM
    巯基乙醇0-100mM>0mM
    单价阳离子0-20mM0-150mM
    磷酸根离子0-10mM0-100mM

    推荐使用量及处理时间:

    用量(终浓度)处理时间
    0.25 U/mL>1 h
    2.5 U/mL>15 min
    25 U/mL>2 min
    使用方法
    1、样本准备:
    贴壁细胞:去除培养基,用 PBS 清洗细胞,去除上清。
    悬浮细胞:离心收集细胞,用 PBS 清洗细胞,6,000 rpm 离心 10 min,收集沉淀。
    大肠杆菌:离心收集菌体,用 PBS 清洗 1 次,8,000 rpm 离心 5 min,收集沉淀。
    2、样品处理:
    将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比 1:(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g 细胞约为 109 个)。
    3、酶的添加:
    按照 250 Units 消化 1 g 细胞沉淀的比例添加,也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。
    4、上清获取:
    以 12,000 rpm 的转速离心 30min 获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。
    【注】若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
    储存/保存方法
    stored at -20℃,有效期1年。
    本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油)中,为无色透明液体。
    技术指标
    内毒素含量:< 0.25EU/1500U
    比活:≥1.1*106U/mg
    基本信息
    别名
    MultiNuclease
    外观
    无色透明液体
    温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
    • 实验方法 实验条件
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