产品描述 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
描述 | 爱必信的快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在5~15分钟内精确完成DNA切割的限制性内切酶,适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。爱必信的快速内切酶具有如下特点:5~15分钟内即可完成酶切;共用一种酶切Buffer,大大简化酶切反应体系;良好的酶活冗余度,轻松应对底物过量或困难模板酶切。此外,爱必信生物去磷酸化、连接试剂在配套的Buffer中具有100%活性,支持一管化反应,提升“酶切-修饰-连接”的体验。 识别位点: 5'...G G ↓ C G C G C C...3' 3'...C C G C G C ↑ G G...5' 同裂酶:PalAI, SgsI 注:同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性。 产品组分:
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使用方法 | 1. DNA 快速酶切流程
a. 本体系适用于经过纯化的 PCR 产物酶切。未纯化的 PCR 产物具备一定的离子强度,10× Cut Buffer 加入量可适当减少至 2 μl。但由于 DNA 聚合酶同时具有外切酶活性,会影响酶切产物,因此如下一步需进行克隆等操作,建议酶切前对 PCR 产物进行纯化。 ② 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴; ③ 37℃温育 15 min(质粒),或 15~30 min(PCR 产物),或 30~60 min(基因组 DNA); ④ 80℃温育 20 min 即可使酶失活,停止反应(可选)。 2. 双酶切或多酶切: ① 每种快速内切酶的用量为 1 μl,并根据需要适当扩大反应体系; ② 所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的 1/10; ③ 如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切反应。 3. 适用于质粒的扩大反应体系:
不同 DNA 中的酶切位点数量:
甲基化修饰影响:
在不同反应缓冲液中的活性:
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储存/保存方法 | -20℃,有效期2年。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
技术指标 | 建议反应条件: | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究 |
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