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如何选择合适的二抗

时间:2019-05-09 点击次数:4483

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二抗,即抗体的抗体,区别于能和抗原特异性结合的、我们平常所说的抗体(一抗),二抗能和对应一抗结合,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。

抗体结构示意图
 
根据同一种来源的同种亚型抗体的Fc段是保守的,可以制备得到对应的二抗
二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用。

二抗带有的可检测标记种类较多,包括酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP)、荧光基团(FITC, RRX, TR, PE)和生物素等。

常规我们都会根据具体的应用实验选择合适标记的二抗:
   ★ western blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗;
   ★ 细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗;
   ★ 免疫组化中也可以使用HRP或AP标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用biotin/avidin检测系统。

此外,在我们选择和使用合适二抗的时候,还需要注意哪些关键点呢?
 
首先当然是一抗的种属来源,二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源。
如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。
二抗的种属来源在一些特殊的实验、如双标实验中需要多注意,需选择与两个一抗都不同来源的第三个种属二抗。

常规最常使用也是性价比最高的二抗形式是IgG h+l形式的,这类抗体和IgG分子的重链和轻链都可以反应,也可以和其他的免疫球蛋白家族(IgM,IgA,IgD,IgE)和亚家族反应,因为所有的免疫球蛋白都有相同的轻链。
 
F(ab’)2片段形式的二抗可以避免与Protein A /G或与Fc受体的结合,其分子本身比较小,更容易渗透入细胞组织结构内而灵敏度更高 。Fab片段形式的二抗只有一个结合位点,可用来封闭内源性的免疫球蛋白。

在二抗的实际使用中,需关注不同厂家产品的浓度及具体实验应用时的稀释比推荐;不同产品的保存也需按照说明书操作。

爱必信金牌二抗产品,高稀释比(可高达1:20000)、高性价比(500ul规格低至600元)、种属应用齐全,您不容错过!
 
- 货号 产品名称 反应种属 应用 规格 价格
anti-Rabbit abs20002 goat anti-rabbit IgG-HRP Rabbit WB,IHC,ELISA 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20040 goat anti-rabbit IgG-HRP Rabbit WB,IHC,ELISA 500ul 600
abs20004 Goat anti-Rabbit IgG-FITC Rabbit IF 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20023 Goat anti-Rabbit IgG-FITC Rabbit FC,IF 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20024 Goat anti-Rabbit IgG-Cy3 Rabbit FC,IF 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20025 Goat anti-Rabbit IgG-AlexaFluor 488 Rabbit FC,IF 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20010 Goat Anti-rabbit IgG/Cy3 Rabbit IF 100ul 400
abs20032 Goat Anti-rabbit IgG/APC antibody Rabbit FC,IF 100ul 700
abs20011 Goat Anti-rabbit IgG antibody Rabbit   1mg 500
abs20022 Donkey Anti-Rabbit IgG-Cy3 Rabbit FC,IF 100ul
500ul
700
2800
abs20020 Donkey anti-Rabbit IgG-AlexaFluor 488 Rabbit FC,IF 100ul
500ul
700
2800
abs20021 Donkey anti-Rabbit IgG-Alexa Fluor 594 Rabbit FC,IF 100ul
500ul
700
2800
abs20009 Donkey Anti-rabbit IgG/APC antibody Rabbit FC,IF 100ul 700
anti-Mouse abs20001 goat anti-mouse IgG-HRP Mouse WB,IHC,ELISA 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20039 goat anti-mouse IgG-HRP Mouse WB,IHC,ELISA 500ul 600
abs20003 Goat anti-Mouse IgG-FITC Mouse WB,IHC,ELISA 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20012 Goat anti-Mouse IgG-FITC Mouse FC,IF 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20013 Goat anti-Mouse IgG-AlexaFluor 488 Mouse FC,IF 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20007 Goat Anti-Mouse IgG/PE antibody mouse FC,IF 100ul 400
abs20015 Donkey anti-Mouse IgG-Cy3 Mouse FC,IF 100ul
500ul
700
2800
abs20016 Donkey anti-Mouse IgG-Cy3 Mouse FC,IF 100ul
500ul
900
3600
abs20017 Donkey anti-Mouse IgG-AlexaFluor 594 Mouse FC,IF 100ul
500ul
700
2800
abs20014 Donkey anti-Mouse IgG-AlexaFluor 488 Mouse FC,IF 100ul
500ul
700
2800
anti-Goat abs20005 Rabbit anti-Goat IgG-HRP Goat WB,IHC,ELISA 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20006 Rabbit anti-Goat IgG-FITC Goat WB,IHC,ELISA 100ul
500ul
1ml
300
1200
1800
abs20026 Donkey anti-Goat IgG-AlexaFluor 488 Goat FC,IF 100ul
500ul
700
2800
abs20027 Donkey anti-Goat IgG-AlexaFluor 647 Goat FC,IF 100ul
500ul
1ml
500
2000
3000
abs20028 Donkey anti-Goat IgG-Cy3 Goat FC,IF 100ul
500ul
700
2800
anti-Rat abs20031 Goat Anti-Rat IgG (H+L),HRP Rat WB,IHC,ELISA 100ul
500ul
1ml
400
1200
1800
anti-Sheep abs20008 Rabbit anti-Sheep IgG h+l Antibody - Adsorbed HRP Conjugated Sheep WB,IHC,ELISA 100ul
500ul
400
1500
anti-Chicken abs20030 Rabbit Anti-Chicken IgY Polyclonal Antibody, Biotin Conjugated Chicken WB,IHC,ELISA,IF 100ul 900
abs20018 Goat anti-Chicken IgY(IgG)-FITC Chicken FC,IF 100ul
500ul
500
2000
abs20019 Donkey anti-Chicken IgY-AlexaFluor 488 Chicken FC,IF 100ul
500ul
700
2800
anti-Guinea Pig  abs20029 Donkey Anti-Guinea Pig IgG-DyLight 405 Guinea Pig FC,IF 500ul 3600

Absin特色产品线(全部现货):
WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

 

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