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免疫（共）沉淀——命中注定我爱你！

时间：2019-01-04 点击次数：4304

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爱必信absin免疫(共)沉淀(IP/CoIP)试剂盒（货号：abs955），现两件6折、100T仅需3000元！截止2019年1月11日。

免疫共沉淀(CoIP)是研究蛋白质相互作用的经典方法，其基于抗体和蛋白的特异性亲和作用，通过捕获与蛋白或抗原特异性结合的抗体，进而从复杂的样品中捕获及富集目标蛋白，同时可以测定与之相互作用的蛋白或其它生物大分子。

免疫沉淀(IP)则主要是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。

（互作蛋白A和B，与对应抗体结合后，再与偶联beads的Protein A/G结合）

免疫（共）沉淀（IP/CoIP）主要实验流程见上图：

（1）转染表达目的蛋白的质粒后，后续主要是转染表达目的蛋白的质粒（2）对样本的裂解处理，（3）蛋白和抗体、珠子的孵育，（4）免疫复合物沉淀洗涤之后，（5）再进行后续分析，常规是做WB，也有用质谱分析的。

可以看出，CoIP本身的实验流程并不复杂，只是为了拿到靠谱又漂亮的结果、需要我们不断优化实验条件，包括裂解液的选择、抗体的选择、Protein A与G的选择和使用量、beads的选择等。

小编收集了以下常见的免疫（共）沉淀需注意点：

1. 细胞裂解采用温和的裂解条件，不能破坏细胞内存在的蛋白质－蛋白质相互作用，多采用非离子变性剂（NP40 或Triton X-100)。每种细胞的裂解
条件是不同的，需要通过经验和试验确定。不能用高浓度的变性剂（0.2％SDS)，细胞裂解液中要加各种酶抑制剂。

2. 免疫（共）沉淀最需要注意点就是抗体的性质。抗体不同、其和抗原的结合能力也不同，WB、IHC能结合未必能用在IP反应。建议仔细检查抗体的
说明书。特别是多抗的特异性是问题。

3. 需充分考虑抗体/缓冲液的比例。抗体过少则不能检出抗原，过多则不能沉降在beads上，残存在上清。缓冲剂太少则不能溶解抗原，过多则抗原
被稀释。

4. 如果拿到免疫复合物后用WB检验，必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，若预测不正确，实验就得不到结果，实验本身具有
冒险性。

那么做CoIP，我们需要拿到怎样的实验验证结果、从而有效证明我们的猜测呢？

Figure from INMAP Overexpression Inhibits Cell Proliferation, Induces Genomic Instability and Functions through p53/p21 Pathways , Zhu Y et al.PLoS One. 2015 Jan 30;10(1)

上图是CoIP验证实验的典型结果图片。INMAP是一个在有丝分裂中起重要作用的蛋白，保证了纺锤体和端粒的完整性，作者通过CoIP验证研究了INMAP通过P53/P21途径起作用。

文章的C和D图中，研究者分别使用Flag单抗和p21抗体，拉下目的蛋白及其互作蛋白后，通过Input的阳性、control组normal lgG的阴性和最终WB分析互作蛋白的阳性，充分验证、结论令人信服！

所以，命中注定的爱情、果然还是需要经过层层考验验证呐！

爱必信作为一个致力于为中国科研事业服务的中国品牌，我们开发的明星爆款产品免疫(共)沉淀(IP/CoIP)试剂盒采用蛋白特异结合能力超强的ProteinA、ProteinG为捕获载体，目的蛋白捕获能力高，试验结果重复性和一致性均得到有效验证。

abs955 免疫(共)沉淀(IP/CoIP)试剂盒组分如下：

试剂组分	包装规格
Lysis buffer	30ml*1
10*Wash buffer	50ml*1
1*SDS 样品缓冲液	1ml*1
Protein A 琼脂糖珠	250μl*1
Protein G 琼脂糖珠	250μl*1

我们的产品优势：

1. 采用优质Protein A、Protein G作为捕获载体，更加节省抗体；

3. 主要辅助试剂均包含在内，一站式解决IP/CoIP实验烦恼；

5. 高性价比，足够实验50次！

2. 试剂盒内组分及操作流程经实验优化，确保更高的检测灵敏度；
4. 实验结果重复性好；

目前爱必信免疫共沉淀试剂盒团购促销中、2件6折，截止2019年1月11日不要错过哦。

货号	产品名称	规格	原价	促销价	货期
abs955	免疫(共)沉淀(IP/CoIP)试剂盒	50tests×2	2500×2	1500×2	现货

Absin特色产品线(全部现货)：
WB相关：ECL发光液、预染marker、预制胶；IHC相关：二抗试剂盒、组化笔；IP/CoIP试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；ELISA试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

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