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二抗的偶联标记

时间:2018-09-11 点击次数:6382

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 一般来讲,耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC, RRX, TR, PE)和生物素。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于western blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗,而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用biotin/avidin检测系统。

下面简单介绍几种二抗探针的优缺点及其适用的实验:

酶:主要有两种不同的酶耦联物,HRP和AP。比较而言,前者更经济、快速、稳定,而后者较前者更为灵敏,通常情况下,HRP广泛应用于免疫组化,western blot 和 ELISA 中,而碱性磷酸酶(AP)更适合于固相的免疫检测实验,如ELISA和western blot.
 ● HRP 标记的二抗
货号 产品名称 反应种属 应用 货期
abs20008 anti-Sheep IgG h+l Antibody (Rabbit) - Adsorbed HRP Conjugated Sheep ELISA: 0.1 - 0.01 ug/ml IHC: 5.0 - 1.0 ug/ml WB: 0.5 - 0.05ug/ml 现货
abs20001 goat anti-mouse IgG-HRP Mouse ELISA: 0.1 - 0.01 ug/ml; IHC: 5.0 - 1.0 ug/ml; WB: 0.5 - 0.05ug/ml 现货
abs20002 goat anti-rabbit IgG-HRP Rabbit ELISA:0.1 - 0.01 ug/ml; IHC: 5.0 - 1.0 ug/ml; WB: 0.5 - 0.05ug/ml 现货
abs20031 Goat Anti-Rat IgG (H+L),HRP Rat IHC 1:500 - 1:5,000; ELISA 1:5,000 - 1:100,000; WB 1:10,000 - 1:200,000 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20005 Rabbit anti-Goat IgG-HRP Goat ELISA: 0.1 - 0.01 ug/ml; IHC: 5.0 - 1.0 ug/ml; WB: 0.5 - 0.05ug/ml 现货


荧光基团:

1. FITC:FITC是广泛使用的荧光基团,但其最大的缺点是淬灭快,使用抗淬灭剂可以减轻。

 ● FITC标记的二抗

货号 产品名称 反应种属 应用 货期
abs20018 Goat anti-Chicken IgY(IgG)-FITC Chicken Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:50 - 1:200 for most applications 现货
abs20003 Goat anti-Mouse IgG-FITC Mouse IF: 10 - 2 ug/ml; IHC: 10 -2 ug/ml; WB: 0.2 - 0.05 ug/ml 现货
abs20012 Goat anti-Mouse IgG-FITC Mouse Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:50 - 1:200 for most applications 现货
abs20004 Goat anti-Rabbit IgG-FITC Rabbit IF:1:100-200 现货
abs20023 Goat anti-Rabbit IgG-FITC Rabbit Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:50 - 1:200 for most applications 现货
abs20006 Rabbit anti-Goat IgG-FITC Goat IF: 10 - 2 ug/ml; IHC: 10 -2 ug/ml; WB: 0.2 - 0.05 ug/ml 现货


2.
AMCA:常用在多标记实验中,如免疫荧光、流式细胞术。其缺点是,淬灭快,且由于肉眼不能很好的检测其所激发的蓝色荧光,因而AMCA耦联的二抗更适用于检测大量存在的抗原。

3. 花青染料(Cy2,Cy3,Cy5):Cy2比FITC更稳定,且在表面荧光显微镜下,Cy2的荧光FITC更强。Cy3和Cy5比大多数荧光基团更亮,更稳定,背景更弱。二者常在共聚焦显微实验中作多标记。但Cy5的缺点是不能用表面荧光显微镜观察,因此通常用具有远红外检测器的共聚焦显微镜观察。

 ● 花青染料标记的二抗

货号 产品名称 反应种属 应用 货期
abs20028 Donkey anti-Goat IgG-Cy3 Goat Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry, IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20015 Donkey anti-Mouse IgG-Cy3 Mouse Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20016 Donkey anti-Mouse IgG-Cy3 Mouse Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20022 Donkey Anti-Rabbit IgG-Cy3 Rabbit Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20024 Goat anti-Rabbit IgG-Cy3 Rabbit Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20010 Goat Anti-rabbit IgG/Cy3 Rb IF=1:100-1000  not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. 现货

4. 
TRITC,RRX,TR:TRITC经常和FITC一起用于双标记实验中,也可以使用RRX或TR,但TR会产生较高的背景。在使用装有氪氢灯的激光共聚焦扫描显微镜作三标记实验时,RRX尤其有用,可以和Cy2(或FITC)及Cy5一起使用,因为RRX的发射波长在Cy2和Cy5中间,且和这两者的重叠很少。
5. PE:常和FITC一起用于流式细胞术双标记实验。

 ● PE标记的二抗
货号 产品名称 反应种属 应用 货期
abs20007 Goat Anti-Mouse IgG/PE antibody mouse Flow-Cyt=1:100-1000 IF=1:100-1000  not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. 现货
 

6. 
生物素:生物素(biotin)可以和抗生素蛋白(avidin)发生不可逆反应而紧密结合在一起。首先加入生物素标记的二抗,在加入耦联有酶或荧光集团的avidin、ExtrAvidin或streptavidin,后者能够结合于二抗表面的多个位点上,从而极大的放大检测信号。

 ● 生物素标记的二抗.
货号 产品名称 反应种属 应用 货期
abs20030 Rabbit Anti-Chicken IgY Polyclonal Antibody, Biotin Conjugated Chicken WB=1:500-2000 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 现货


  ● 其他热卖二抗

货号 产品名称 反应种属 应用 货期
abs20009 Donkey Anti-rabbit IgG/APC antibody rabbit Flow-Cyt=1:100-1000 IF=1:100-1000 现货
abs20032 Goat Anti-rabbit IgG/APC antibody rabbit Flow-Cyt=1:100-1000 IF=1:100-1000 现货
abs20033 Rabbit Anti-pig IgG antibody pig WB=1:1000-5000 ELISA=1:2000-10000 IHC-P=1:200-1000 IHC-F=1:200-1000 现货
abs20019 Donkey anti-Chicken IgY-AlexaFluor 488 Chicken Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20026 Donkey anti-Goat IgG-AlexaFluor 488 Goat Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20027 Donkey anti-Goat IgG-AlexaFluor 647 Goat Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry, IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20029 Donkey Anti-Guinea Pig IgG-DyLight 405 Guinea Pig Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry, IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20014 Donkey anti-Mouse IgG-AlexaFluor 488 Mouse Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20017 Donkey anti-Mouse IgG-AlexaFluor 594 Mouse Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20021 Donkey anti-Rabbit IgG-Alexa Fluor 594 Rabbit Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20020 Donkey anti-Rabbit IgG-AlexaFluor 488 Rabbit Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20013 Goat anti-Mouse IgG-AlexaFluor 488 Mouse Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs20011 Goat Anti-rabbit IgG antibody Rabbit, Quail not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. 现货
abs20025 Goat anti-Rabbit IgG-AlexaFluor 488 Rabbit Histo-/Cyto-Chemistry,Flow Cytometry,IF 1:100 - 1:800 for most applications 现货
abs957 即用型高效免疫组化二抗试剂盒     现货


Absin特色产品线(全部现货):
二抗、标签抗体、对照抗体;WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;细胞因子、信号通路调节剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒、呼吸爆发试剂盒;动植物提取物,定制服务(抗体、多肽)...

 

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