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胎牛血清(FBS)的选购宝典

添加时间: 2017-04-28 作者: 爱必信 浏览次数: 416
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胎牛血清

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
 
胎牛血清要求:
   1、性状、外观:浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
   2、蛋白质含量:3.5%~5.0%( w/v)
   3、血红蛋白含量:≤ 0.02%( w/v)
   4、无菌检验:阴性
   5、支原体检验:阴性
   6、细菌内毒素:≤5(EU/ml)
   7、牛腹泻病毒:阴性
   8、大肠杆菌噬菌体:阴性
   9、支持细胞增殖:(Sp2/0-Ag14) 生长曲线 (接种浓度)最大增殖浓度 ≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间:≤15h,克隆率:≥85%
 
胎牛血清功能
牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
   1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
   2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
   3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
   4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
   5.起酸碱度缓冲液作用。
   6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
 
胎牛血清的评估标准
胎牛血清(FBS)是最常用的血清添加剂,因为它富含生长因子、蛋白和大分子。尽管无血清和非动物来源的培养基也逐渐走红,但许多细胞系未必适用,并且存在费用较高和生长较慢等缺点。那么,研究人员在评估FBS的质量时,需要考虑哪些标准呢?
对于细胞培养而言,血清的重要性不言而喻。它含有蛋白、生长因子、氨基酸、脂类、碳水化合物、维生素及其他组分,可以促进贴壁或悬浮细胞的生长和维持。胎牛血清(FBS)是最常用的血清添加剂,因为它富含生长因子、蛋白和大分子。尽管无血清和非动物来源的培养基也逐渐走红,但许多细胞系未必适用,并且存在费用较高和生长较慢等缺点。
 
目前,市场上存在着不同等级的FBS。由于FBS关乎细胞活力和实验重复性等重要的参数,故在质量方面是绝对不能含糊的。若质量不稳定,则有可能导致实验失败。那么,研究人员在评估FBS的质量时,需要考虑哪些标准呢?
 
1.可追溯性 
对于科学家而言,最大的风险也许是FBS的纯度大打折扣,这可能导致细胞培养实验的效果不佳。许多FBS的卖家与多个产地签订短期供应协议来采集原材料,以便降低成本。他们将这些产品混合,稀释不同来源的影响。然而,最终结果就是质量不稳定,产品供应和价格出现波动。

针对这一问题,国际血清行业协会(ISIA)实施了供应链可追溯性的行业标准,这对确保FBS各个批次的质量、安全性和重复性起了关键作用。一些公司提供化学分析,说明原产国的统计概率。也许最好的方法是追溯到动物,以确保产品的来源。

FBS的供应商是否在整个供应链中都保留原产地的可追溯记录?他们是否持有文件,支持各个阶段的处理、运输和商业交易?他们能否展示独特来源的可追溯性,以确保重复性和低病毒风险?在考虑购买FBS时,这都是你需要考虑的问题。

地域性风险评估(GBR)是定性评估一个国家或地区的动物感染疾病(如疯牛病)的可能性。这种方法依赖世界动物卫生组织(OIE)的监控系统,将每个国家或地区的疯牛病风险进行分类。OIE评估各个国家的兽医服务、疾病诊断能力、觉察症状能力及其他因素,以避免疯牛病的传播。 

新西兰和澳大利亚都获得了GBR 1级,这意味着它们目前是没有疯牛病和口蹄疫的。这两个国家都是出了名的病毒风险最低的国家。由于环境受到保护,以及严格的农业法规和入境要求,再加上它们都是岛国,动物们不太可能受到其他地区疾病的影响。这对于那些敏感的细胞系和实验而言特别有用。对科学家来说,好处是花在重复实验或检验新批次上的时间将大大减少。

2.产品质量 
对血清而言,产品质量尤为关键。由美国食品和药品管理局(FDA)执行的cGMP规范建立了完整体系,以确保制造过程和工厂的正确设计、监控和控制。在购买血清时,你最好选择遵从cGMP规范的供应商,以便降低产品混合和标签错误的风险。
确保各批次一致性还涉及其他因素,包括牛群环境、食物来源以及质量控制检测程序。正确采集血清,才能保证它天然的促进生长特性,并实现FBS产品的出色表现。当然,这些资料收集起来可不容易,那么你可以依靠国际公认机构(如FDA、USDA、AQIS等行业协会)的认证,来寻找理想的供应商。
 
3.稳定价格
有时,FBS的价格会大幅波动,这取决于许多因素。作为肉类行业的副产品,FBS的生产在本质上会受到天气和食物供应、经济条件和牛群规模等各种因素的影响。如果病毒不定期再来捣乱一下,那么牛的数量必然下降,FBS的供应也势必减少。此外,由于干旱导致奶牛饲养费用较高,农民可能会将牛卖掉或屠宰,导致牛群数量下降。

值得一提的是,全世界对FBS的需求还在不断增加。每年,全球大约生产600,000 L的FBS,其中cGMP等级的不足200,000 L,而后者正是大多数工业生产公司的要求。随着大型制药公司的需求上升,FBS的价格也在持续上涨。此时,找到一家可以提供同批次FBS的供应商是十分必要的,这既确保了产品供应,也在一定程度上避免价格波动。

4.产品检测
定期的产品检测当然也不能少。大家应注意产品的供应商是否定期进行生化、激素、病毒和功能方面的检测,包括检测细菌、病毒及其他微生物是否存在,以确保产品经过全面鉴定。质量控制检测也应当开展,以确保血清产品始终符合规定并合乎规格。
总的来说,FBS及其他血清有可能大大影响细胞培养工作的质量和重复性。因此,在购买过程中,我们有必要对FBS的身世、质量以及质检过程做到心中有数,而不仅仅被价格所左右,这样才能改善实验结果,节省宝贵时间

 


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